1M Hepes溶液(PH8.0,无菌)

快速掌握无菌操作

商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌，但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作，避免污染。请始终使用适当的灭菌方法（如高压灭菌器、除菌过滤器）对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免

FACSAria流式细胞仪无菌分选的基本流程

一、环境和液流的消毒 1、准备足量的无菌1×PBS（3L左右）和去离子水（10L左右）。PBS和去离子水可高压灭菌，sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75％ 医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次，然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、房间在分选前紫外灯照射15－20分钟；用1:50新洁尔灭拖地；用75％ 医用酒精擦拭工作台和收集架；用75％ 医用酒精喷洒分选细胞收集区和上样区。 二、开机和管道的消毒 1、将Sheath液换为活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液（不要

HEPES缓冲液的配制和使用方法

试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。 关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下： 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制 119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES