青霉素溶液100U/mL

家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法

Material and method：Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清，转换生长因子（TGF-β1）(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒（10ug/mL胰岛素，5ug/mL转铁蛋白，和0.5ng/mL亚硒酸盐）青霉素100U/Ml，链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原

牛或猪大血管原代内皮细胞的分离-灌注酶消化法

实验材料： 1. 牛或猪 2. PBS，含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml 3. 0.1%Ⅰ型胶原酶 4. 眼科剪，眼科镊 5. 慕丝线 6. 离心管（15ml、50ml） 实验方法： 1. 分离牛或猪的主动脉等大血管，长15-20cm，用丝线结扎血管各分支后，取出主动脉。放入含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml的PBS中，清洗血管，洗净血迹。 2. 用眼科剪和眼科镊剔除血管外膜的脂肪和结缔组织，用加入抗菌素的PBS冲洗

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

supplement，青霉素、链霉素各100U/ml，EGF 20 ng/mL，b-FGF 10ng/mL。用火焰抛光的吸管反复吹打，分散组织制成单细胞悬液，吸取9滴细胞悬液、1滴0.4℅台盼蓝溶液混合，用血细胞计数板在3分钟内计数出活细胞和死细胞（台盼蓝排斥法），调整细胞密度，以105个/ mL接种75mL培养瓶中（NUNC）, 于5℅CO2 培养箱, 37℃培养。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。 ②传代培养：当神经球直径大约100um时收集细胞于离心管中，600转离心5分钟，弃上清，加入无血清培养基重悬