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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 服务名称:
pCMV-SPORT6-Aplf(mouse)(1点突变缺失一段)
- 规格:
干粉质粒
[ 产品信息 ]
| 名称: | pCMV-SPORT6-Aplf(mouse)(1点突变缺失一段) |
|---|---|
| 别称: | NM_024251.4(1点突变缺失一段);2010301N04Rik; AI452191 |
| 货号: | BES236295PVE |
| 基因长: | 1437bp |
| 质粒宿主: | 大肠杆菌 |
| 质粒用途: | 基因模板 |
| 片段类型: | cDNA |
| 片段物种: | 小鼠 |
| 原核抗性: | Amp |
| 复制子: | pUC |
| 感受态: | DH5a |
| 温度: | 37度 |
| 背景载体: | pCMV-SPORT6 |
| 正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
| 反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
pCMV-SPORT6-Aplf(mouse)(1点突变缺失一段)
[ 质粒图谱 ]
根据质粒序列用软件生成相应图谱
[ 操作说明 ]
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
[ 参考序列 ]
TTTCCTTGATTCAAAGCATGCTGGTACCGGTCCGGAATTCCCGGGATATCGTCGACCCACGCGTCCGCGGACGCGTGGGCGGACGCGTGGGCTCACCAGGAAAGGAGCCTCGGGTTTCACACCCCTTCGGGCCATGCCCAGCGTGCCTGAGGGAGGTGGCTACGAGATAACAGACAAAAGAGTATCCAGAAGACATGCCATTCTTGAAGTGGTTGATAGTCAGCTTCGAATCAAGCCAAATCTGAAGTGGAGATGGAGTGTACTCTGAGAAACAGTCAGATGCTTGATGAAGATGATATATTGAGTGAGATGCAGAAGTCCCCTGTGGTTAACTTACCTGATAAGACAACTGGTGCCTCACAGCTGCAAGGAAGCCCTGAAATAACCAAGACCAAGTGTCCCACCATAGATCCTATGTCCTCTTCAGGTGAATGCAGAGCTTTCAGTGAGCACCAGCCACATCCTACCCAGAGGAAAAGAATCCTCCCAGCTTGGATGTTGGCGGAAAGTCTAAGTGACCAGAGCCTCTCCACACCAGCTGAGGGGGGAGATAAGGATGTCATCCAGAGGAGTGGAAAAGCAGGAACCTGTGAAGATAGAACCCCAGGAAACACATCATGGCATGGGAAAAAGCGGCTTAGTCCATCAGGAAATTCAAAAAGTGTGTCAGCGGAACAAGACCCTGGGAAGAAGTGCAGAAAGGCTGACCAAGAAGGACCGGGTGTTTCTTCTGAGAATGTTCCAGAATCATCATCTTCAAACATAGTAAAGGACCCAGATGTGGATATTGTGAAGACAAATAAACAGAAGGACGGGATTTTAATAGAGGAACTTGGTGAGGTCTCTAAACATAAAGCCGCCACCAAACCAACCACAAATGAAGAGGGCGAGAGTTGTGCACGTGTCCAAAGCAAGTCACCTCCTGGAGAAATCTCAAGGATGCCATCCTGAGTCTAGCTCTGCTCCCTCCAGTCCTGGTGCTTTGCACACAGACACAG
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