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- 顺辰生物
- SC-L265
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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 保质期：
1年
- 供应商：
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
40%凝胶配制缓冲液（37.5:1）
规格：200ml ; 500ml
储存条件：4℃避光，有效期1年。
用途：用于蛋白质电泳。
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文献和实验℃。 实验步骤 凝胶配制 1） 根据目的蛋白分子量按比例配制分离胶，缓慢摇动混匀，避免由于剧烈混匀混入氧气。待凝胶溶液混合均匀后，将混匀的凝胶溶液缓慢注入两层玻璃板中，再在液面上小心注入一层无水乙醇，以阻止氧气接触凝胶溶液影响凝胶的聚合，保持水平，在 37 ℃ 恒温箱中静置约 1 小时，直至凝胶溶液完全聚合凝固。 2） 按比例配制浓缩胶，缓慢摇动混匀，倒掉分离胶上层无水乙醇并用滤纸吸去已凝固分离胶上的无水乙醇，平缓注入浓缩胶溶液，小心插入梳子，避免齿尖产生气泡。在 37 ℃ 恒温箱中
一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
20,000 g（约15,000转）15分钟 6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存 7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度 8. 取相同质量的细胞裂解液（体积*蛋白质浓度），并加等体积的2×电泳加样缓冲液 9. 沸水浴中3分钟 10. 上样 11. 电泳（浓缩胶20mA，分离胶35mA） 12. 电转膜仪转膜（100mA 40分钟） 13
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