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深圳顺辰生物科技有限公司
普通滤纸(60cm×60cm)
普通滤纸(60cm×60cm)
普通滤纸(7cm×9cm)
普通滤纸(7cm×9cm)
普通滤纸(7cm×9cm)
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文献和实验液:临用前配制。甲液:取冰乙酸(AR)15ml,无水乙醇(AR)85ml,混匀置试剂瓶内,塞紧瓶塞,备用。乙液:取冰乙酸(AR)25ml,无水乙醇(AR)75ml,混匀置试剂瓶内,塞紧瓶塞,备用。(4)保存液:液体石蜡。(5)定量洗脱液(0.4mol/L NaOH溶液):称取16g氢氧化钠(AR)用少量蒸馏水溶解后定容至1000ml。材料:未溶血的人或动物血清器材: 醋酸纤维薄膜(2×8厘米);常压电泳仪;点样器(市售或自制);培养皿(染色及漂洗)(直径9cm—10cm);普通滤纸;玻璃板;钝头镊子
0.001g)(6)称量瓶(7)恒温水浴(8)烘箱(9)样品筛(60 目)3.试剂 无水乙醚或低沸点石油醚(A.R.) 四、操作步骤 1.准备工作 将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温。按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重(记作a)、称量时室内相对湿度必须低于70%。 2.包装和干燥 在上述已称重的滤纸包中装入3g 左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃
或者使用微量进样器直接在靠近点样孔底部的位置点样。 (5)冰浴中,恒压60~80V电泳约1.5h,至溴酚蓝指示带距底部约3cm处。 3、转膜 (1)电泳结束后,取出凝胶,浸入预冷的0.5XTBE缓冲液中。 (2)转膜所用的膜以及滤纸也需用0.5XTBE缓冲液浸湿(也可以事先用0.5XTBE缓冲液浸泡10min)。 (3)组装“三明治”,从负极(黑色)到正极(红色)依次为:滤纸、胶、膜、滤纸。 (4)组装转膜装置,确保装置所有正负极都连接正确。(这一点大多数人都知道,但在实际操作中往往
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