iF546-Tyramide

iF546-Tyramide 产品简介

酪胺信号放大技术（Tyramide signal amplification，简称TSA），是一类利用HRP对靶标抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法，可以应用于IF/IHC的信号放大。TSA技术主要原理：在过氧化氢H2O2存在时，辣根过氧化物酶HRP可以催化酪胺为一种非常活跃的短寿命中间体，在短时间内，中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物，大量富集成以酶为中心的类似“岛”状的聚集团，因使用荧光染料标记的酪胺，使得抗原-抗体结合部位形成大量的荧光素沉积，实现信号放大。

酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量，节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像，也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标，因此可使用不同的荧光酪胺反复标记实现多重荧光染色。

储存与运输：冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，有效期12个月。

注意事项

1、本产品室温融化后，使用离心机进行短暂离心，干净吸头吹吸混匀后取用。

2、与荧光二抗相比，TSA试剂盒有更高的灵敏度和更强的信号。因此一抗使用浓度需降低，一般在抗体说明书建议的稀释比基础上再扩大5-10倍，以减少非特异性结合导致的背景荧光。建议设置一抗梯度浓度获得最佳效果。

3、如背景荧光较强，建议增加组织自发荧光淬灭步骤。

4、荧光Tyramide的建议稀释比是1:500，可根据实验结果调整稀释比例（建议稀释比例范围1:200-1:1000）。

5、稀释液需自备，为1×TBST含0.003%H2O2。1×TBST100 mL，加入100μL 3%H2O2，混匀即可。该稀释液容易失效，建议现配现用。

6、如进行多重荧光标记，建议先孵育多抗，后孵育单抗；先孵育高丰度目的蛋白对应的抗体，再孵育低丰度目的蛋白对应的抗体。具体操作步骤可参考本公司TSAPLus荧光多标（1-7种标记，2-8色荧光）染色试剂盒。

7、操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。