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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
500ml
用途:沉淀RNA
注意事项:主要由氯化锂、无水乙醇组成。
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文献和实验1、方法一试剂:(1)变性液组成:25 g异硫氰酸胍溶于33 ml CSB中(42 mmol/L pH4.0乙酸钠、0.83%十二烷基肌氨酸钠、0.2 mmol/L β-巯基乙醇),65 ℃溶解,过滤灭菌,4 ℃预冷。(2)酸性酚配制:55 ℃时,500 g酚溶入500 ml 50 mmol/L,pH4.0乙酸钠,混匀,静止分层后,去上清,再反复加500 ml 50 mmol/L,pH4.0乙酸钠,直到pH。操作步骤:(1)细胞收集:含一定浓度的细胞培养液置于无菌离心管中,4 ℃,3000 g
mMβ-巯基乙醇),65℃溶解,过滤灭菌,4℃预冷。 2酸性酚配制:55℃时,500g酚溶入500ml50mM,pH4.0乙酸钠,混匀,静止分层后,去上清,再反复加500ml50mM,pH4.0乙酸钠,直到pH 方法二:氯化锂法提取总RNA 本方法用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA酶,用氯化锂选择沉淀RNA,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA得率不高,小RNA片断丢失的缺陷。 仪器:同上 试剂: 氯化锂/尿素溶液【氯化锂126g
,4℃,10000g,20分钟。上层水相吸至无菌离心管中。等体积异丙醇二次沉淀(-70℃,30分钟),75%乙醇洗沉淀,沉淀冷冻干燥,复溶于去RNA 酶的水中(对于准备长期保存的RNA 可加入pH 5.0的乙酸钠至终浓度为0.25M,再加入2.5体积的乙醇,-70℃保存。)注:1变性液组成:25g异硫氰酸胍溶于33mlCSB(42mM pH4.0乙酸钠、0.83%十二烷基肌氨酸钠、0.2mM β-巯基乙醇),65℃溶解,过滤灭菌,4℃预冷。2酸性酚配制:55℃时,500g酚溶入500ml50
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