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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 保质期:
1年
- 供应商:
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件:
常温
APPLYGEN 蛋白预制胶(8% Bis-Tris 12 孔)+10包电泳粉末 1.0mm
APPLYGEN蛋白预制胶(Bis-Tris体系)是一种使用安全、方便、性价比很高的聚bing烯酰胺预制凝胶, 采用Bis-Tris缓冲体系,与常规系统相比,缓冲能力更强,分辨率更高,蛋白条带更为清晰锐利。预制胶配套MOPS电泳试剂,能高效、稳定地分离蛋白质,便于后续转膜或染色,常用于PAGE和Western检测。
产品特点:
1:稳定性强 — 采用自动化的灌胶生产技术,保证预制胶产品批次间的稳定性和条带分布的一致性。
2:分辨率高 — 采用Bis-Tris缓冲体系,缓冲能力更强,分辨率更高,蛋白条带更为清晰锐利
3:即开即用 — 无需自己手动配制溶液和繁琐的灌胶操作
4:兼容性好 — 兼容市场上主流的mini电泳槽,如BIORAD、六一、天能等
5:性价比高 — 预制胶中配套MOPS电泳缓冲粉末,节约科研经费,实验成本
:APPLYGEN蛋白预制胶(Bis-Tris体系)提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶,并有12孔和15孔两种选择。凝胶厚度为1.0mm,建议上样量为30μl/20μl,胶板尺寸:长×宽×厚度为100×85×4.7mm;凝胶尺寸为:长×宽×厚度为85×70×1mm。
保存:
4°C 12个月
使用方法:
1. 取出预制胶,撕去胶底部蓝色胶条,并将其固定在电泳槽中。
2. 准备电泳缓冲液:将赠送的电泳液粉末包用500ml dH2O溶解,得到1XMOPS电泳液。
3. 一般内槽电泳液加满,外槽电泳液没过电泳槽底部的阳极即可,注意不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出,用移液器吸取电泳液轻轻吹打加样孔去除加样孔内残余的储存缓冲液。
4. 上样时注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变型造成漏液。
5. 电泳条件:建议100-150V, 40~60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
6. 电泳结束取出凝胶,用撬具小心插入胶版之间的空隙,撬动胶板上、中、下三个位置,至完全分离,将胶板有胶一侧浸入蒸馏水中贴着水面,胶板倾斜轻轻提起,凝胶入水,取出进行后续实验。电泳结束,取出凝胶。用撬具小心插入胶板之间的空隙,撬动胶板上、中、下三个位置,直至完全分开,将胶板有胶一侧浸入蒸馏水中贴着水面,胶板倾斜轻轻提起,凝胶入水,取出进行后续实验。
注意:
1. 此预制胶需使用提供的MOPS缓冲系统,或自行配制请勿使用Tris-Glycine等其他电泳缓冲液电泳,。
MOPS Running Buffer 配方
名称 浓度
Tris 50mM
MOPS 0.1%
EDTA 1mM
2. 可根据情况,适当调整电压。
3. 可使用Tris-Glycine转膜液转膜。转膜前,将凝胶浸泡在转膜液中10-15min,充分平衡凝胶中的缓冲液再转膜。
4. 上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7. 此预制胶比不适用于Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽配套的NuPAGE® Gel或Novex® Mini Gel。
8. 本预制胶为了兼容几乎所有厂家的凝胶电泳槽,改进了与电泳槽U型硅橡胶密封条的吻合结构(如Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN® Tetra Cell电泳槽)。Bio-Rad、Tanon等其他品牌硅胶密封条凸起的电泳槽的使用注意事项如下: 在电泳时须将具有突起结构的U型硅橡胶密封条取出后反过来安装,使其没有突起的平滑面朝外,防止漏液,
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文献和实验胶分为两种:NuPAGE Bis-Tris Gel(适合中等大小或小蛋白,2.5-200 kDa)和NuPAGE Tris-Acetate Gel(尤其适用于大蛋白,30-400 kDa)。目前有五种浓度(10%、12%、4-12%、7%、3-8%)、两种厚度(1.0mm和1.5mm)以及不同孔数可供选择,总有一款合你心水。现在的促销价是每盒(10块)576元,比较实惠,不过就是与其他电泳槽不兼容,还要再花1980元买一个Novex XCell II Surelock?电泳槽。相关的缓冲
买了。现在胶的价格降了2/3,也算是一个福音吧。NuPAGE胶专利的中性pH 和缓冲系统使凝胶 非常稳定(12个月的保质期),而且配合NuPAGE Antioxidant一起使用,使蛋白不易降解和氧化,提供了最佳的条带分辨率,减少了蛋白的修饰,改善了Western blot 的分析结果;电泳时间只需要35分钟,非常省时。很多用户使用后反映条带确实很sharp,比自己配胶可强多了。 NuPAGE胶分为两种:NuPAGE Bis-Tris Gel(适合中等大小或小蛋白,2.5-200
,说是马血清可封闭牛血清刺激PC12分化的位点,究竟位点在哪?是否和NGF刺激位点一致,尚不清楚。不过按5%HS,10%FBS培养应该没错。 丁香园monde的观点: 我养这个细胞一年多了,有点经验和大家交流一下。 1.我用的是15%的马血清和2.5%的胎牛,胎牛要用进口的,国产的容易分化。 2.关于表面处理的问题,值得注意的是胶原和多聚赖氨酸使细胞贴壁的原理不太一样。多聚就是纯粹的物理黏附作用,而胶原则是刺激的细胞,使细胞的表达一些能有助于贴壁的蛋白,这种刺激作用还涉及到MAPK途径
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