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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20
- 保质期:
12个月
- 英文名:
重组人Ribonuclease 3 (RNASE3)蛋白(NM_002935)
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
50/100μg
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文献和实验Mol/L PBS 含0.05% Tween 203. 封闭液: 3%BSA(用洗涤液配制)4. 酶标抗体的稀释:用封闭液稀释5. OPD底物Buffer:Na2HPO4.12H2O 1.84g柠檬酸 0.51gDDW 100ml6. 显色液(现配现用):底物Buffer 10mlOPD 2mg30% H2O2 2ml7. 终止液 2Mol/L H2SO48. 重组人TFAR19, HRP标记的羊抗人IgG9. ELISA板, Tip, 移液器,ELISAReader(OD490nm),洗板机操作
。在这个实验中,自然的蛋白质存在于穿出峰中,而没有加工完全的蛋白质则保留在柱子上。 12. 吸收谱测定的范围是 350~220 nm。在 280 nm 的背景吸收是通过用 320 nm 和 350 nm 之间的吸收与 280 nm 的吸收线性外推来校正的。摩尔消光系数和分子量是根据 Gill 和 Hippel 来计算得到的 [45]。 13. 对于半衰期短的酶来说,反应的头几秒非常重要,所以加入酶后应立即检测。另外,应该使用每秒至少能读一次数据的分光光度仪。 14. 酶学反应的衰减是利用
的吸光度说明如下: 260nm、320nm、230nm、280nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白质等有机物的吸光度值。OD260/OD280(R)体现了RNA中的蛋白质等有机物的污染程度,质量较好的RNA的R值应在1.8~2.0之间,当R2.2时,说明RNA已经被水解成了单核苷酸。在对核酸进行吸光度检测时,需要注意稀释液应使用TEBuffer。 [Q3] 如何计算RNA的浓度? RNA浓度=(OD260-OD320)×稀释倍数×0.04 μg/μl。 [Q4
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