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人肠高糖素(Glicentin) ELISA试剂盒 | Hu

man Glicentin ELISA Kit
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  • 辰辉创聚生物
  • 1.2pg/mL -45 pg/mL
  • 中国
  • NBE-236760
  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      北京辰辉创聚生物技术有限公司

    • 检测范围

      1.2pg/mL -45 pg/mL

    • 检测方法

      双抗夹心法

    • 应用

      测定人血清、血浆及相关液体样本中肠高糖素(Glicentin)含量。

    • 适应物种

      Human

    • 规格

      48T/96T

    产品细节图片1

    | 产品信息

    品名:NebuEasy™ 人肠高糖素(Glicentin) ELISA试剂盒

    货号:NBE-236760

    品牌:Nebulabio

    规格:48T/96T

     

    | 检测原理

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肠高糖素(Glicentin)水平。用纯化的人肠高糖素(Glicentin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肠高糖素(Glicentin),再与 HRP 标记的肠高糖素(Glicentin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肠高糖素(Glicentin)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人肠高糖素(Glicentin)浓度。

     

    | 产品属性

    物种:Human

    靶点信息:肠高糖素(Glicentin)

    检测范围:1.2pg/mL -45 pg/mL

    产品应用:NebuEasy™ 人肠高糖素(Glicentin) ELISA试剂盒(产品编号:NBE-236760)可用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肠高糖素(Glicentin)含量。

    储存条件:4℃保存,有效期见标签

     

     

    | 操作步骤

    1.标准品稀释:

    标准品编号

    标准品浓度

    标准品配置方法

    5号标准品

    40pg/mL

    将150μl的原始标准品加入150μl标准品稀释液

    4号标准品

    20pg/mL

    将150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

    3号标准品

    10pg/mL

    将150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

    2号标准品

    5pg/mL

    将150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

    1号标准品

    2.5pg/mL

    将150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及壁,轻轻晃动混匀。

    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.温育:操作同步骤3

    8.洗涤:操作同步骤5

    9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

     

    | 计算结果

    以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

     

    | 注意事项

    1)标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。另外,本试剂盒不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    2)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡1小时后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    3)浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    4)各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    5)请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    6)封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    7)底物请避光保存。

    8)严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准

    9)所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

     

     

     

     

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