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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
双酶切后,嵌入表达载体pTrc-99B的NcoI和HindIII两个酶切位点间的切口内。得到的LeuRS 6个变种酶基因的正确性用DNA测序证实。 2. LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化 1) 将含有LeuRS及其六个变种酶LeuRS-E292K,LeuRS-E292F,LeuRS-E292S,LeuRS-E292D,LeuRS-E292Q,LeuRS-E292A的基因的重组质粒转化到在大肠杆菌菌株TG1中,挑选含有正确质粒的转化子至5 mL氨节
in s b y r ep lacem en t w ith 4 - f lu o r o tr y p to p h a n . Biochem, J . 2 4 9 , 305-308. 8. P arso n s, J. F. , X iao, G. , Gilliland, G. L. , and A rm stro n g , R N. ( 1 9 9 8 ) Enzymes harboring u n n atu
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