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文献和实验,然后再进行后续封闭漂洗等步骤,为的就是防止小分子蛋白在后续操作中洗脱了。于是乎说干就干,开始了我的再次改进的实验历程,说来简单,实际上从25号到1号,一共8天时间,我大概做了12次WB,终于能够重复出来结果了。要点如下:1、电转液中一定不要加SDS。对于大分子量蛋白加入SDS是为了增加转膜效率,道理上是增加了蛋白表面电荷。而对于小分子量蛋白,SDS千万不能加,否则会封闭小分子蛋白的抗原位点(我忘记从哪里看到的了,文献不能在这里给出,大家勿吐槽我哈)2、从最开始纠结于电转过程,使劲摸索电转条件,现在发现
定或不是从高到低趋于稳定); 4. 换溶氧膜时电解液内不能留有气泡,膜不能折皱,多余的膜割除干净; 5. 传感器电解液干了一定要更换溶氧膜; 6. 换溶氧传感器膜片时要先用去离子水或蒸馏水冲洗掉旧的、残留的电解液,滴入2、3滴新电解液并甩干。普通溶解氧传感器要滴满新电解液至液面鼓起,压上溶氧膜,不留气泡;盖膜要注入半量新电解液,旋紧; 7. 盖膜更换后即可使用,普通膜更换后应放置一夜,让膜与电解质完全平衡; 8. 溶氧膜表面受到沾污要细心清洗干净,不能损伤膜; 9. 东南科仪技术
1、电极的安装1.1 刚出厂的电极为干燥状态,在使用前,按下列顺序装膜:a. 在膜盒中小心用镊子钳取出薄膜;b. 将光滑平整无孔圆形薄漠平放在托座上;c. 套上衬环,使薄膜紧压在托座上;d. 将压环旋入托座;e. 用工具插入托座底部槽内旋紧即可。(亦可使用钢尺圆弧部分作为工具)。1.2 用蒸馏水清洗电极腔体数次,再用电解液清洗腔体一次,将黄金电极向上且直倒置,加入电解液至溢出黄金表面。1.3 将固定膜的压环放于黄金电极上,用左手轻轻拉住压环,旋入紧帽。在旋入过程中薄膜会逐渐贴紧黄金电极表面
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