6788308哈希HACH Kit, Maint., 低量程

流式检测凋亡的讨论

酶活化，DNA降解，细胞DNA减少，因而可在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰，也就是凋亡峰。 lard：除左跑gel 之外最平就是他了. (PI 一個flow sample 才RMB 0.6, 不計机的錢)。其實跑gel+PI 已夠說明那東西是會引起apoptosis。用antibody/kit 都是另有要求. shaman3：其实，PI分不清晚期凋亡和已经死的细胞，在做有关凋亡的流式检测的时候利用的是磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） 磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine

生物芯片入门（四）：基因表达谱芯片实验操作2

杂交互补杂交要根据探针的类型、长度以及研究目的来选择优化杂交条件。如用于基因表达检测，杂交时需要高盐浓度、样品浓度高、低温和长时间（往往要求过夜），但严谨性要求则比较低，这有利于增加检测的特异性和低拷贝基因检测的灵敏度；若用于突变检测，要鉴别出单碱基错配，需要故需要在短时间内（几小时）、低盐、高温条件下高严谨性杂交。多态性分析或者基因测序时，每个核苷酸或突变位都必须检测出来，通常设计出一套四种寡聚核酸，在靶序列上跨越每个位点，只在中央位点碱基有所不同，根据每套探针在某一特点位点的杂交严谨程度

关于细胞凋亡的讨论

处于调亡时，由于核成碎片状，从而使此时的胞浆的calcein着色呈碎片状，但是PI为阴性。细胞坏死时，胞浆的calcein染色基本上属于正常，但是PI为阳性，有时可以看到膜内有空泡。但是晚期调亡细胞，胞浆有calcein着色并呈碎片状，而且PI为阳性。3、PI和Annexin-V双标： Annexin-V（green）可以和胞膜内的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合。正常细胞膜的磷脂双分子层排列整齐，但是如果细胞损伤时，酯脂双分子层的排列就会被打乱，内层的可能会翻转到外层，Annexin-V就可以检测