真空式过滤器(500mL，PES膜，0.22um）

G418筛选稳定表达细胞系实验步骤

相关专题   1.G418的配制 ： 方案一： 300mgG418加入3ml PBS 溶液，浓度为100mg/ml，完全溶解后，0.22um 过滤，-20℃保存。 方案二：(1)配制1M HEPES：23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O，10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3，过滤除菌 (较难过滤)，4℃保存，终浓度为1mol/L。 (2)5g

滤器相关问题

。过滤除菌操作步骤：首先将过滤器、接液瓶用纸包好，滤膜可放在培养皿内用纸包好。使用前先经121℃高压蒸汽灭菌30分钟；在超净工作台上，将滤器装置装好，用灭菌无齿镊子将滤膜安放在隔板上，滤膜粗糙面向上；然后将待除菌的液体注入滤器内，开动真空泵即可过滤除菌。滤液经培养证明无菌生长后可保存备用。一定要采用质量好的膜，滤纸一定要安装平整，滤纸四周受的张力要均匀，不能有褶皱，你可以一次过滤500ml，免得压力太大，同时负压吸力不要开太大，我以前用的是象呼吸科用的呼吸器，手工挤压丁香园网友solo_wjq的观点

Omega质粒大量提取流程

乙醇 实验步骤   1. 取100- 200ml 菌液3,500-5,000 x g室温离心10min收集菌体沉淀； 2. 小心去除上清液，加10 ml Solution Ⅰ/ RNase A，涡旋或用移液枪上下吹打重悬菌体； 3. 加10 ml SolutionⅡ，来回颠倒10- 15次轻柔混匀，得到澄清的裂解液。 4. 加5 ml Buffer N3，颠倒混匀几次直至出现白色絮状沉淀，室温放置2-3min让其充分反应。