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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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5mg
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文献和实验的发生有关。 拿到这样的结果,已经是一个很好的开始了。 图片来源:文献截图 2、从 mRNA 到 miRNA 寻找靶向关系 从 mRNA 到 miRNA 也是这个研究引入外泌体的重要步骤。作者预测了可能与 FOXO1 靶向的 miRNA,根据软件预测结合文献研究,最终选择了 miR-135b。 发现 miR-135b 在胃癌组织中显著上调,表达与 FOXO1 的 mRNA 水平呈现负相关,说明他们之前可能存在靶向调控关系。 当然,作者在文章中没有一开始去验证这个关系,在后续通过双荧光素酶实验
了来自结肠直肠癌(CRC)患者和健康人血清外泌体中的 miRNA 表达有明显的差异。 作者先通过外泌体 miRNA 测序(4 个 CRC 患者和 2 个健康人)观察外泌体的 miRNA 差异表达,选取了 29 个下调 miRNAs 和 9 个上调 miRNAs 作为候选标志物。 再使用 RT-qPCR(165 个 CRC 患者和 153 个健康人)进一步验证,最后发现与健康人相比,早期 CRC 患者外泌体 miR-99b-5p 和 miR-150-5p 的表达水平显著降低,术后外泌体 miR-99b-5
的假复层上皮结构。随着时间的推移,培养 60-85 天的类器官状态最佳。 B、生成芽尖祖细胞 11B、向各孔中加入 0.5ml 人芽尖祖细胞类器官培养基,确保完全覆盖 Matrigel 液滴。每 3-5 天换液一次。 12B、如果类器官出现腔中积攒了细胞碎片,或下沉到 Matrigel 的底部,则用移液管轻轻刮培养孔底部,以解离含有类器官的 Matrigel。 13B、用移液器将 Matrigel 液滴和周围的培养基一同吸出,并放置于显微镜下,轻轻去除旧的 Matrigel,小心不要切到组织
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