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爱必信(上海)生物科技有限公司
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1g
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文献和实验氯胺T法标记效率高、重复性好、试剂便宜易得,是目前使用最多的碘标记方法。 1 .原理氯氨 —T ( Chloramine--T )是一种温和的氧化剂,在水溶液中产生次氯酸,可使碘阴离子氧化 成碘分子。这活性碘可取代肽链上酪氨酸苯环上羟基位的一个或两个氢,使之成为含有放射性碘化酪氨酸的多肽链。 2.方法以 125 I—AVP的制备为例
。 5.使用抗体溶液PBS 或其他缓冲液透析,以去除未结合的生物素。由于生物素分子较大,透析比预期的要慢,或使用蛋白质A或蛋白G层析柱再次纯化抗体。 6.标记抗体按纯化抗体的储存方法保存。 放射性碘标记抗体 蛋白质的碘标记方法有很多种,比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。 操作步骤 1.在碘标记前,准备氯甘脲包试管(2支6mm碱性玻璃管或1.5ml锥形试管)。氯甘脲溶于浓度0.5μg/ml的氯仿中。然后将其分别加入试管管100μl和20μl。让氯仿在通风柜中挥发
酸腺苷(ADP),并释放出无机磷酸,与铅离子结合产生磷酸铅,遇硫则生成硫化铅黑色沉淀,可用下列简式表示: 脱氢酶:在脱氢酶作用下,氯化三苯基四氮唑(TTC)被还原为三苯基甲(TTF),溶液从无色变成红色,反应式如下: 本实验学习用于检定植物组织中的细胞色素氧化酶,过氧化物酶,多酚氧化酶,三磷酸腺苷酶以及脱氢酶的技术。 仪器药品 冰冻切片机
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