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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
2×500ml
用途:蛋白质组学电泳
注意事项:含阳极缓冲液和阴极缓冲液各一瓶,5倍稀释后使用。
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文献和实验两部分;外格装有铂电极(直径0.5~0.8cm);里格为可放滤纸E的有机玻璃电泳槽架,此架可从槽中取出;两侧电泳槽A内的铂电极经隔离导线穿过槽壁与外接电泳仪电源相连。电源为具有稳压器的直流电源,常压电泳一般在100~500V,高压电泳一般在500~10000V。 2. 操作法 (1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。 (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol
2×Buffer(适用于pH4-6):1)尿素:2.4g;2)pH3.5-10载体两性电解质:20μl;3)pH4-6载体两性电解质:100μl;4)20%Triton X-100:500μl:5)2-巯基乙醇:50μl;双蒸水:1.7ml;1%溴酚蓝:200μl电泳:操作步骤:1.将蛋白样品于等体积的2×上样缓冲液混合,10000×g离心5min以除去蛋白质沉淀;2.用微量注射器将蛋白质样品加入到上样空底部,注意不要溢出来。注意:对于考马斯亮蓝染色液来说,每个泳道10-30μg的蛋白混合粗提
从边上漏,我用透明胶(约4cm宽),封住两边,下面还是用2%的琼脂封。灌好电极缓冲液[25m mol/LTris,192m mol/L 甘氨酸及0.1%SDS],按25mA/板胶恒流进行电泳,待溴酚兰离底部1cm时即可停止电泳,一般电泳耗时约4-5h。银染:凝胶于40%甲醇,10%醋酸中固定1h以上或者过夜;用水洗1次,5min;30%乙醇洗2×20min;水洗6×5min; 0.02%硫代硫酸钠1min;水洗3×20s;0.2%硝酸银,0.02%甲醛快速的润洗一次,就是过一下的意思,到这个溶液进去
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