- ￥800 - 1200
- SHCM
- 进口
- SHC4291
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | HS27 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-1734 |
| 中文名称： | 人包皮皮肤成纤维细胞 |
| 细胞数量： | 1*10^6 |
| 组织来源： | 包皮；成纤维细胞；男性 |
| 细胞种属： | 人 |
| 生长特性： | 贴壁 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基： | H-DMEM，90%；FBS，10%；双抗。 |
| 传代方法： | 1:2-1:4 |
| 培养条件： | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存： | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
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文献和实验，5min），弃上清液； ⑤ 用DMEM培养液将沉淀的细胞团制成细胞悬液； ⑥ 细胞计数，调整细胞密度； 3. 有血清培养：原代细胞和传代后的1—3代细胞用10%胎牛血清的DMEM培养液维持培养； ① 以5×10-5 个/ml的密度将细胞接种于培养瓶中。于37℃、5%CO2 培养箱内培养。每2—3d换液一次； ② 原代培养至成纤维细胞汇合成单层后，按常规方法传代； 4. 无血清培养：用DMF培养液支持已建立细胞系的包皮成纤维细胞的生长和增长； ① 取在含血清条件下已生长汇合
基因治疗中的皮肤成纤维细胞途径 与骨髓细胞 相比，皮肤成纤维细胞用作基因治疗靶细胞的研究起步虽晚一些，然而由于皮肤成纤维细胞在获得、培养以及移植等方面的便易性，它在基因治疗中的发展很快。 皮肤成纤维细胞容易获取，对培养要求低，操作技术难度小，在普通实验室中容易推广。原代成纤维细胞具有较强的扩增能力，能够迅速传代40―50代次，扩增数百万倍以上。成纤维细胞在体外扩增之后也容易植回体内，还可根据需要重新取出。此外，成纤维细胞对基因转移载体要求较低，基因转移效率
我养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长，所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底，也就是细胞与细胞之间没有间隙时，就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液，用D-Hanks液洗两遍，再加入0.25%的胰酶，加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底，然后静置两分钟左右，最好是能在显微镜下观察，当细胞之间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶，加入含
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