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鼠胚成纤维细胞

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  • SHCM
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  • SHC3832
  • 2025年07月12日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    产品名称:SYF
    商品货号:SHC-2237
    中文名称: 鼠胚成纤维细胞
    形态特征: 成纤维细胞样
    生长特性:贴壁生长
    特征特性:SYF细胞是1997年从含有Src家族蛋白酪氨酸激酶Src、Yes和Fyn两个等位基因功能性空突变的小鼠胚胎中产生的。 细胞在传代2之前通过感染转导SV40大T抗原的逆转录病毒载体而永生化。Syf细胞也携带新霉素抗性基因。
    细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
    培养条件:DMEM +10%FBS
    传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
    细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
    复苏细胞步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS 

    细胞  新模板2_01.jpg细胞  新模板2_02.jpg细胞  新模板2_03.jpg细胞  新模板2_04.jpg细胞  新模板2_05.jpg细胞  新模板2_06.jpg细胞  新模板2_07.jpg细胞  新模板2_08.jpg


           

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