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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海淳麦生物
- 适应物种:
人/大鼠/小鼠等各类物种
- 样本:
血清 细胞等
- 规格:
48T/96T
产品名称:UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)ELISA试剂盒
用途
该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)ELISA试剂盒需自备的设备及试剂
1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量加液器及吸头
3、稀释样品的EP 管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)ELISA试剂盒储存及有效期:
1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶
液A、检测溶液B 以及96 孔板保存于-20oC。
2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于
-20oC,避免潮湿。
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1 个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)ELISA试剂盒标本的采集与保存:
1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即
可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,
取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3、组织匀浆:
1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后
再匀浆);
2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充
分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融
进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。
3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。
4、细胞裂解液:
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷PBS 洗3 次;
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融):
i 超声破碎:取适量PBS 重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂。
ii 反复冻融:将待破碎的细胞在-20oC 以下冰冻,室温融解,反复3 次,使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8oC 1500×g 离心10 分钟,收集上清备用。
5、细胞培养上清或其它生物标本:请1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保
存,但应避免反复冻融。
注意:
1、以上标本均需密封保存,4oC 保存应小于1 周,-20oC 不应超过1 个月,-80oC 不应超过2 个月。
2、标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
3、标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。
UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)ELISA试剂盒操作步骤:
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1.Add 100 μL of standard or sample to each well. |
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2.Remove the liquid. |
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3.Add 100 μL Biotinylated Detection Ab. Incubate 1 hour at 37℃.Aspirate and wash 3 times. |
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4.Add 100 μL HRP Conjugate. Incubate 30 min at 37℃.Aspirate and wash 5 times. |
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5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃. |
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6.Add 50 μL of Stop Solution. |
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7.Read the OD at 450 nm immediately. Calculation of the results. |
上海淳麦生物是专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的专业性生物科技公司。本着服务科学的理念,赛泓瑞建立了生命科学研究工具的研发、生产、销售及技术服务平台,现已有数万余种产品,并每年不断开发新产品,为广大的生命科学研究人员、医学、药学、农业、环保等的科研人员提供科研工具性产品及技术服务.
经营范围:ELISA试剂盒、原代细胞和细胞株、化学试剂、蛋白、抗体、分子试剂和试剂盒。
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文献和实验与一些内源性的物质(如葡萄糖醛酸、甘氨酸、硫酸等)结合或经甲基化、乙酰化排出体外。药物的结合反应,常常使其转化为无活性的代谢物,且极性增加,以便药物排出体外。 药物的结合反应包括葡萄糖醛酸结合、硫酸化、乙酰化、甲基化、谷胱甘肽结合、氨基酸结合及缩合反应等。葡萄糖醛酸结合反应是体内生物转化最重要、最普遍的结合反应。葡萄糖醛酸基的直接供体是尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)(见图1)。 图1 葡萄糖醛酸结合反应 葡糖醛酸基转移酶(UGT)催化的葡萄糖醛酸化代谢反应是以尿苷5’-二
蛋白,如 Src-家族激酶,被 N-肉豆蔻酰化。N-肉豆蔻酰基转移酶 (NMT) 专门促进 N-肉豆蔻酰化,并使用肉豆蔻酰 coa 作为底物将肉豆蔻酰基连接到 N-末端甘氨酸上。因为甲硫氨酸是所有真核生物蛋白质的 N-末端氨基酸,这个 PTM 在添加肉豆蔻酰基之前需要甲硫氨酸被上述 MAP 裂解;这是单个蛋白质上多个 PTM 的一个例子。③、S-palmitoylation(S-棕榈酰化)通过棕榈酰酰基转移酶 (PAT) 将来自棕榈酰基 CoA 的 C16 棕榈酰基添加到半胱氨酸残基的硫醇盐侧链。由于疏水
与一些内源性的物质(如葡萄糖醛酸、甘氨酸、硫酸等)结合或经甲基化、乙酰化排出体外。药物的结合反应,常常使其转化为无活性的代谢物,且极性增加,以便药物排出体外。药物的结合反应包括葡萄糖醛酸结合、硫酸化、乙酰化、甲基化、谷胱甘肽结合、氨基酸结合及缩合反应等。葡萄糖醛酸结合反应是体内生物转化最重要、最普遍的结合反应。葡萄糖醛酸基的直接供体是尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)(见图 1)。图 1 葡萄糖醛酸结合反应葡糖醛酸基转移酶(UGT)催化的葡萄糖醛酸化代谢反应是以尿苷 5'-二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA
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