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30
- 英文名:
Ni-NTA Sepharose 6FF (His-Tag)
- 供应商:
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
Ni-NTA 6FF (His-Tag) 蛋白琼脂糖纯化树脂
英文名:Ni-NTA Sepharose 6FF (His-Tag)
储存:冷藏(2-8℃)
包装:10ML/25ML/100ML/250ML/1L
属性:
基质:6%高交联琼脂糖
平均粒径:90 μm
蛋白结合能力:~40 mg 组氨酸标签蛋白/1 ml树脂
最大流速:600 cm/h
配体密度:~ 25 μmol/ml
耐压:0.3 MPa, 3 bar
储存液:20% 乙醇
酸碱稳定性:3 - 12(工作);2 - 14(CIP,去镍)
储存温度:4~8°C 不可冻存
化学稳定性:常用水相缓冲液,1 M NaOH,70%醋酸,2% SDS,30%异丙醇,6M盐酸胍,8M尿素
应用:
用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和 哺乳动物细胞等)的组氨酸标签蛋白的纯化。
组分:
10 ml/25 ml/100 ml/250 ml/1 L
产品描述:
该介质的基质为平均粒径90μm的6%高度交联琼脂糖,金属离子螯合配基经共价连接具有良好的稳定性。 螯合配基带有二价的Ni2+,是纯化多数组氨酸标签蛋白的介质。该介质的配基密度经过优化从而保证了高蛋白结合载量和高选择性,而高流速特性使得该介质适合于大规模纯化。
特点:
1.相比三价金属离子螯合剂亚氨基二乙酸制成的Ni-IDA-琼脂糖,Ni-NTA-琼脂糖的非特异性吸附明显减少,可让使用者获得更高纯度的目标蛋白; 2.支持变性包涵体蛋白的柱上复性,起到分离、复性同步进行的效果; 3.可耐受一定浓度的还原试剂; 4.琼脂糖基质在pH 2~14范围内保持稳定,可耐受反复在位清洗(CIP); 5. 纯化过程中极少的Ni2+渗漏; 6. 可以反复使用和再生5~10次。
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文献和实验,在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用(如Ni离子,Zn离子,Co离子等),从而达到纯化蛋白的目的。此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成: 降低pH(4.5-6) b. 加入EDTA C.不同浓度咪唑溶液(20-250mM) 当蛋白洗脱完毕后,使用EDTA使纯化树脂与金属离子分离,即可完成树脂的再生。 Strep-tag®则是基于链霉亲和素(Streptavidin)和生物素这一自然的相互作用,将Strep-tag®II(WSHPQFEK)或Twin-Strep-tag®
His-tag protein purification using Ni-NTA magnetic beads
His-tag protein purification using Ni-NTA magnetic beads Materials and reagents Extraction buffer 20 mM Tris-HCl, pH 8.0 1 mM PMSF 1 mg/ml lysozyme 0.05
性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出。Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱,梯度洗脱,咪唑竞争性结合到硫酸镍上,目的蛋白就被洗脱了,这时候收集浸出液,那么里面就是你要的目的蛋白,然后透析掉咪唑就行了。现在的柱子大多是预装柱,也就是不用自己填柱,就是装好镍的傻瓜柱,也不贵,上样,洗脱,基本两个步骤就结束了。剩下的看你怎么处理了。 高亲和Ni-NTA纯化介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂 糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制备
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