大鼠脓毒症模型服务

一、实验动物准备

1. 品系选择：多选用健康雄性SD大鼠，体重范围180-250g（部分文献使用Wistar大鼠）。
2. 适应性饲养：实验前适应性饲养7天，保持标准饮食和光照周期。
3. 术前处理：术前12小时禁食但不禁水，以减少麻醉并发症。

二、麻醉与消毒

1. 麻醉方式：
   • 常用戊ba比妥钠（40-50 mg/kg腹腔注射）或水合氯醛（4%溶液腹腔注射）。
   • 部分研究使用异氟烷气体麻醉。
2. 备皮与消毒：腹部正中区域剃毛，碘伏或络合碘消毒皮肤。

三、手术操作（CLP法）

1. 腹部切口：
   • 沿腹中线做1.5-2 cm纵向切口，逐层切开皮肤、肌肉层及腹膜。
2. 盲肠暴露与处理：
   • 轻提出盲肠，分离肠系膜，避免损伤血管。
   • 结扎位置：多数文献在盲肠远端1/3至中点处结扎（使用3-0或4-0缝合线），具体位置影响模型严重程度。例如：

• 结扎回盲部5 mm处（模拟中度脓毒症）；
• 结扎远端2/3盲肠（模拟重度脓毒症）。

1. 穿孔操作：
   • 使用18-22G针头在结扎处远端穿刺1-2次，形成贯通孔。
   • 部分研究要求挤出少量肠内容物至腹腔以增强感染，或放置引流条（如3 mm×0.5 mm×30 mm）。
2. 关腹与术后处理：
   • 将盲肠复位，逐层缝合腹腔，消毒切口。
   • 皮下注射生理盐水（3-5 mL/100g）或林格氏液补液，部分研究追加镇痛药（如布洛芬）。

四、模型评估与质量控制

1. 术后观察：
   • 记录大鼠苏醒时间、活动度、呼吸频率及生存率。
   • 典型症状包括竖毛、腹泻、呼吸急促、精神萎靡等。
2. 剔除标准：
   • 术后24小时内死亡、切口感染或不符合预期症状的大鼠需剔除。
3. 生物学指标检测：
   • 血液指标：IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子显著升高。
   • 器官病理：肝脏、肾脏、肺等器官的炎症细胞浸润和坏死。
   • 代谢指标：血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、转氨酶（ALT/AST）升高。

五、其他建模方法（补充）

1. LPS诱导法：静脉或腹腔注射脂多糖（5-20 mg/kg），快速诱导全身炎症反应，但缺乏感染源。
2. 细菌感染法：腹腔注射大肠杆菌（1×10^8 CFU/mL）或铜绿假单胞菌，模拟特定病原体感染。

六、注意事项

1. 盲肠结扎位置：结扎越靠近回盲部，脓毒症程度越重。
2. 针头选择：18G针头穿孔可提高模型稳定性，20G针头可能导致死亡率过高。
3. 术后护理：补液和镇痛可减少非感染因素导致的早期死亡。