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- 详细信息
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- 保存条件:
室温,6个月
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
500ml
用途:核酸杂交后漂洗溶液
注意事项:主要由SSC、曲拉通-100、灭菌水等组成,离子强度较低。
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文献和实验-HCl,1 mmol/L EDTA。 (10)NTE缓冲液:500 mmol/L NaCl,10 mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L EDTA pH8.0 (11) 预杂交缓冲液:含50%去离子甲酰胺的4×SSC (12)NBT/BCIP液:(NBT:氯化氮四唑蓝,BCIP:5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐) A、将10 mg NBT溶于200 ml 二甲基甲酰胺中。 B、于37℃加入1ml底物缓冲液(50 mmol/L Tris HCl PH
尼龙膜在某些方面比硝酸纤维素膜好,它的强度大、耐用,可与小至10bp的片段共价结合。在低离子浓度缓冲液等多种条件下,它们都可与DNA单链或RNA紧密结合,且多数膜不需烧烤。尼龙膜韧性好,可反复处理与杂交,而不丢失被检标本。它通过疏水键和离子键与核酸结合,结合力为350~500μg/cm2,比硝酸纤维素膜(80~100μg/cm2)强许多。尼龙膜的缺点是对蛋白有高亲合力,不宜使用非同位素探针。
1000ng/ml,而原位杂交中,无论应用何种标记探针,其用量均为0.5~5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度,但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。 (四)杂交率 在探针过量的条件下,杂交率主要依赖于探针长度(复杂度)和探针浓度。 (五)杂交最适温度 杂交技术最重要的因素之一是选择最适的杂交反应温度。若反应温度低于Tm 10~15℃,碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链,错配对减少。若反应温度再低(Tm-30℃),虽然互补链之间也可形成稳定
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