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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(TwoStep gDNA Removal)
- 供应商:
天津本生
二步法基因组DNA去除逆转录试剂盒
产品信息
产品名称
Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(TwoStep gDNA Removal)二步法基因组DNA去除逆转录试剂盒
产品编号:HRF0195
规格:100T
产品描述
本制品以RNA为模板,采用预混合技术,用5×HRbio™ III RT Reaction Mix(已经预混合了HRbio™ III Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer)高效合成第一链cDNA,操作简单。
本制品采用分子进化技术,高达60°C的全新高温反转录酶,可以通读GC含量丰富,二级结构复杂的RNA模板,极大提高反转录效率和长度。 可用于更长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊gDNA Remover,只需一步操作,即可同时完成基因组清除与逆转录反应,极大简化了操作步骤,避免了复杂加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。
产品用途
第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的克隆和检测,尤其适合GC含量高,复杂模板的高温反转录。
产品特点
1.新一代高温反转录酶极大提高了包括复杂RNA模板的反转录效率和长度。合成cDNA长度高达15 kb以上。
2.全预混的反转录Mix,只需加入RNA、引物和水,简单快速完成反转录。
3.gDNA Remover仅需2分钟清除DNA残留,不需要DNase 消化和后续繁琐步骤。
4.预混合Mix在-20°C不冻结,减少了化冻和混匀时间,使用更简单。
5.本产品针对qPCR进行特别优化oligo dT和N6随机引物配比,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始并具有相同的反转录效率,程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
性,与目的模板竞争引物和酶等,可能导致PCR扩增效率的下降,影响定量结果的准确性;另外,并不是每个基因都能在相邻的且大小合适的外显子上找到合适的跨内含子引物,所以,很大部分实验需要在一个外显子上设计引物,这时就必须经过去除基因组DNA步骤,才能得到准确可靠的结果。 传统基因组DNA去除的方法采用对RNA进行处理,由于引入了蛋白(DNase I),后续需要进行氯仿抽提纯化,操作繁琐,耗时长,RNA的回收率低。TIANGEN公司的FastQuantcDNA第一链合成试剂盒(KR106
认为离心柱式的RNA纯化系统纯化的样品RNA在制备探针会在Atlas Glass Microarray上有较高的背景,因而特别设计用硫氰酸胍/酚抽提制备适用于Atlas Glass Microarray样品RNA以便进行下一步的荧光/同位素标记。 2. Genomic DNA的分离纯化: 对于Genotyping、SNP分析和Genomic Chip来说,要检测基因组或者染色体上的突变就需要制备样品的基因组DNA而非RNA以进行检测。在这里简单介绍几个常用的试剂盒,有关详细资料和操作手册欢迎
用硫氰酸胍/酚抽提制备适用于Atlas Glass Microarray样品RNA以便进行下一步的荧光/同位素标记。 2. Genomic DNA的分离纯化: 对于Genotyping、SNP分析和Genomic Chip来说,要检测基因组或者染色体上的突变就需要制备样品的基因组DNA而非RNA以进行检测。在这里简单介绍几个常用的试剂盒。 QIAGEN公司专利的样品纯化技术方便快速从多种临床样品中纯化高质量的Genomic DNA,无需酚氯仿抽提和乙醇沉淀。根据不同的样品来源可以选择特定的试剂盒
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