溶出介质(EP,pH2.2)，RC62992-500ml

碱裂解法大量提取质粒（500mL菌液）

溶液Ⅱ组成：NaOH,SDS。两种物质在溶液Ⅱ中的终浓度分别为：0.2mol/L NaOH，1%SDS(m/V)。根据需要体积(V)，各自配制成2倍浓度1/2体积(V/2)，两者等体积混合即得。 配制体积 250mL 500mL (1)NaOH(M=40.01)： 0.2 mol/L 2.00g 4.00g 2倍： 0.4 mol/L 4.00g 8.00g (2)SDS(M=121.1): 1% 2.5g 5g 2倍： 2% 5g

手把手教你染色体步移

染色体步移是一种常用的克隆已知基因旁侧序列的技术。基因的表达调控已成为分子生物学研究热点之一，启动子是基因表达调控的重要顺式元件，启动子的克隆对于研究基因表达调控，构建基因工程载体，表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多，常见的扩增启动子或已知序列末端旁侧的核苷酸序列的方法有两种：方法一 酶切加接头1 大量提取基因组 DNA（1）取样品 100 mg，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 uL 裂解液（56 °C），用研磨棒充分匀浆。（2）加入 350 uL 苯酚（pH

手把手教你使用酸法提取组蛋白

结束后可以在管底看到一小团接近透明的沉淀，小心吸尽上清，用 1ML NETN buffer 洗沉淀一次或两次，1500g,4℃，离心 10min5、吸尽上清，小心吸，沉淀容易被吸走，加入 0.2M HCL 100ul （浓盐酸的浓度为 12M）冰水裂解 30min,(30min 后沉淀变成一个白色的小团块)6、12000RPM，4℃，15min 离心，此时组蛋白已经溶解在上清中，将上清转移到新的 EP 管中，加入 20ul 的 1M Tris ph=8.0 中和酸性（5 倍体积的 HCL 加 1 倍