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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
100ml
用途:可以将死细胞染成蓝色,活细胞的液泡系呈红色。
注意事项:液泡系包括高尔基复合体、溶酶体、内质网、转运泡、吞噬泡等。中性红是液泡系的专一活性染色剂,在细胞处于生活状态时,只将液泡系染成红色,细胞质和细胞核不被染色。
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文献和实验1、 试剂的配置: ① 台盼蓝:4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。 ② 中性红:先配成1%中性红水溶液(1克中性红溶于100毫升蒸馏水中)。取这种溶液1毫升,用0.6%生理盐水(或蒸馏水)稀释到50毫升,即成0.02%中性红水溶液,贮存在棕色瓶里,放在黑暗处。 ③ 美蓝:取0.5克美蓝,溶于30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氢氧化钾溶液,保存在棕色瓶内。此溶液能染细胞
(2) 37℃细胞培养箱中培养48小时后,显微镜下观察,取细胞状态和细胞数量适应的玻片做染色。 (3) 去掉旧培养液,用冰冷的PBS洗两次,加3.7-4%甲醛0.5ml(in PBS)室温固定10min (4) PBS洗两次,加穿膜液0.5ml(0.1%triton X-100+0.1M Gycine)冰上30min (5) PBS洗两次,加5mg/ml BSA 0.3ml室温封闭1小时。 (6) PBS洗两次,取一张封口膜,做好标记,加一抗(用5mg/ml
)值。计算 TNF 的活性。 三、美蓝染色检测法1、用细胞因子处理靶细胞,在含 100 μ l 细胞培养液的检测孔中,每孔加 0.02ml 25 %戊二醛固定活细胞 15 分钟,用自来水缓缓洗去死细胞和固定液。2、每孔加 0.1ml 0.05 %美蓝染液,染色 20 分钟,用自来水缓缓冲净染液,晾干。3、每孔加 0.2ml 0.33mol/L 盐酸溶解美蓝,振荡混匀。在 665nm 波长处测定光吸收度。计算 TNF 的活性。 四、中性红染色检测法 1、用细胞因子处理靶细胞,在含 100 μ l
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