硕华 334042 1000μl透明吸头，带滤芯，长度102

原位杂交组织化学实验技术

～20μl/每张切片为宜。杂交液过多不仅造成浪费，而且液量过多常易致盖玻片滑动脱落，影响杂交效果，过量的杂交液含核酸探针浓度过高，反易导致高背景染色等不良后果。 　　2．探针的长度一般应用于ISHH探针的最佳长度应在50～100个碱基之间。探针短易进入细胞，杂交率高，杂交时间短。据报告，长500个碱基的探针，其杂交时间约需20h左右。200～500个碱基的探针仍可应用，如超过500个碱基的探针则在杂交前最好用碱或水解酶进行水解，使其变成短的片段，达到实验所需求的碱基数。 　　附：核酸

【核酸杂交讨论专栏】--新附转载文章一篇

1000ng/ml，而原位杂交中，无论应用何种标记探针，其用量均为0.5～5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度，但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。 （四）杂交率 在探针过量的条件下，杂交率主要依赖于探针长度（复杂度）和探针浓度。 （五）杂交最适温度 杂交技术最重要的因素之一是选择最适的杂交反应温度。若反应温度低于Tm 10～15℃，碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链，错配对减少。若反应温度再低（Tm-30℃），虽然互补链之间也可形成稳定

细胞培养完整手册

O 0.06g，加 H2O至 1000mlG1 注：Hank’s液可以高压灭菌。4℃下保存。 3、用手术剪将肝脏剪成小块（1mm2），再用 Hank’s液洗三次，转移至小青霉素瓶中。 4、视组织块量加入 5—6倍的 0.25%胰酶液，37℃中消化 20—40分钟，每隔 5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。 5、加入 3—5ml培养液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。 6、静置 5—10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。 7、1000rpm，离心 10分钟，弃