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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
费雪医学研究医学公司
- 库存:
15
- 级别:
优级纯
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
重组或天然
- 保质期:
2年
- 抗体英文名:
NGH-McAb
- 抗体名:
淋球菌单克隆抗体
- 标记物:
HRP,FITC等
- 宿主:
小鼠
- 适应物种:
小鼠
- 免疫原:
淋球菌抗原
- 亚型:
IgG1、IgG2a、IgG2b、IgM 等
- 形态:
液体
- 应用范围:
WB、ELISA 胶体金等
- 浓度:
2mg/ml
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1mg

淋球菌单克隆抗体;淋球菌抗体;淋病奈瑟菌抗体;NGH-McAb ;NGH抗体
淋球菌,学名淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae),是引起淋病的病原体,以下是关于它的基本情况、传播途径、致病机制、临床表现以及诊断和防治方面的介绍:
基本介绍
形态结构:淋球菌为革兰氏阴性双球菌,呈肾形或咖啡豆状,常成对排列,相邻面扁平或稍凹。无芽孢,无鞭毛,有菌毛。
培养特性:淋球菌对营养要求较高,通常需要在含有血液、血清或其他特殊营养物质的培养基上才能生长。最适生长温度为 35 - 36℃,最适 pH 为 7.2 - 7.6。在巧克力血琼脂平板上,经 24 - 48 小时培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、透明或半透明的菌落。
抵抗力:淋球菌抵抗力较弱,对热、冷、干燥和消毒剂均敏感。在干燥环境中,数小时即可死亡;在 55℃条件下,5 分钟内即被杀死。一般的消毒剂如碘伏、新洁尔灭等能迅速将其杀灭。
传播途径
性接触传播:这是淋球菌最主要的传播途径,在淋病患者中,绝大多数是通过性交感染的。与淋病患者发生性行为时,淋球菌可通过生殖器黏膜的接触而传染给对方。
间接接触传播:少数情况下,可通过接触被淋球菌污染的物品而感染,如共用毛巾、浴巾、浴盆、马桶座圈等。但这种传播方式相对较少见,且通常需要接触到含有大量淋球菌的污染物才可能感染。
母婴传播:患有淋病的孕妇,在分娩过程中,胎儿经过产道时可能会被淋球菌感染,引起新生儿淋球菌性眼炎,又称新生儿脓漏眼。
致病机制
菌毛:菌毛是淋球菌重要的致病因子,它能使细菌黏附在尿道和生殖道黏膜上皮细胞表面,避免被尿液冲刷掉,同时还能介导细菌进入上皮细胞内,引发感染。
外膜蛋白:淋球菌外膜蛋白可以帮助细菌抵抗机体的免疫防御,如逃避吞噬细胞的吞噬作用,还能参与细菌与宿主细胞的相互作用,促进细菌在宿主体内的定植和繁殖。
脂多糖:淋球菌的脂多糖具有内毒素活性,可引起局部炎症反应,导致组织损伤和病变。在感染部位,脂多糖可激活补体系统,吸引中性粒细胞等免疫细胞聚集,释放炎症介质,引起红肿、疼痛、脓性分泌物等症状。
临床表现
男性淋病:主要表现为尿道炎症状,如尿频、尿急、尿痛、尿道口红肿,有脓性分泌物排出。病情严重时,可出现排尿困难、血尿等症状。如果不及时治疗,炎症可蔓延至后尿道、前列腺、精囊等部位,引起附睾炎、前列腺炎等并发症,影响生育功能。
女性淋病:女性淋病的症状相对复杂,且部分患者可能没有明显症状。常见的症状包括尿道炎、宫颈炎,表现为尿频、尿急、尿痛、阴道分泌物增多,呈脓性或黏液脓性,可伴有外阴瘙痒、灼热感。淋病还可引起前庭大腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎等并发症,严重者可导致输卵管阻塞,引起不孕或宫外孕。
诊断方法
涂片检查:取患者尿道或宫颈分泌物涂片,革兰氏染色后镜检,若发现革兰氏阴性双球菌,结合临床症状,可初步诊断为淋病。但涂片检查的敏感性和特异性有限,对于女性患者,由于阴道内正常菌群的干扰,涂片结果可能不准确,因此一般不作为女性淋病的确诊方法。
培养检查:培养检查是诊断淋病的金标准。将患者的分泌物接种于特定的培养基上,在适宜的条件下培养,观察是否有淋球菌生长。培养阳性者,再进行涂片鉴定和药敏试验,以确定病原体并指导临床用药。
核酸检测:如聚合酶链反应(PCR)等核酸检测方法,具有较高的敏感性和特异性,可检测出淋球菌的特异性基因片段,有助于早期诊断和无症状感染者的筛查。但核酸检测需要专业的设备和技术人员,且可能存在假阳性结果,一般需要结合临床症状和其他检查结果综合判断。

淋球菌单克隆抗体是针对淋球菌特定抗原产生的高度均一、高度特异性的抗体,在淋球菌的检测、研究及潜在治疗方面有重要作用:
制备
一般先将淋球菌的特定抗原(如菌毛蛋白、外膜蛋白等)提取出来,然后将其注射到实验动物(如小鼠)体内,使动物的免疫系统产生针对该抗原的免疫反应。
取免疫后的动物脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞。通过筛选和克隆化培养,获得能够稳定分泌针对淋球菌特定抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。最后,对筛选出的杂交瘤细胞进行大量培养,即可获得大量的淋球菌单克隆抗体。
应用
诊断检测
免疫荧光法:将淋球菌单克隆抗体用荧光素标记,与临床样本(如尿道或宫颈分泌物)中的淋球菌抗原结合,在荧光显微镜下观察,若出现特异性荧光,则可快速诊断淋球菌感染。该方法特异性强、敏感性高,能够快速检测出样本中的淋球菌,尤其适用于早期感染或症状不典型的病例。
酶联免疫吸附试验(ELISA):利用淋球菌单克隆抗体与淋球菌抗原的特异性结合,通过酶标二抗和底物显色来检测样本中是否存在淋球菌抗原。这种方法可以进行定量分析,可用于大规模的临床筛查和流行病学调查,能够快速、准确地检测出大量样本中的淋球菌感染情况。
免疫胶体金法:将淋球菌单克隆抗体固定在硝酸纤维素膜上,当样本中的淋球菌抗原与金标抗体结合后,会在膜上形成红色条带,可用于现场快速检测。此方法操作简便、快速,不需要特殊设备,适用于基层医疗单位或现场检测,但敏感性相对较低。
研究工具
抗原定位与分析:通过免疫组化技术,使用淋球菌单克隆抗体可以确定淋球菌抗原在细菌表面或内部的具体位置,有助于深入了解淋球菌的结构和功能,以及其与宿主细胞的相互作用机制。例如,明确菌毛蛋白在淋球菌黏附宿主细胞过程中的作用位点。
疫苗研发:利用淋球菌单克隆抗体可以筛选出具有免疫原性的抗原表位,为研制淋球菌疫苗提供依据。通过对这些表位的进一步研究和优化,可以开发出更有效的疫苗,激发机体产生特异性免疫反应,预防淋球菌感染。
治疗探索
理论上,淋球菌单克隆抗体可以通过与淋球菌表面的抗原结合,阻断其与宿主细胞的黏附、侵袭等过程,从而发挥治疗作用。例如,针对淋球菌菌毛的单克隆抗体可以阻止淋球菌黏附到尿道或宫颈黏膜上皮细胞,进而减轻感染。不过,目前淋球菌单克隆抗体在治疗方面的应用还处于研究阶段,尚未广泛应用于临床。
抗体类型:鼠源IgG
该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。
亚 型:IgG2a,IgM,IgG2b,IgG1
来源:BALB/C小鼠
免疫原: 淋球菌抗原
可用于免疫荧光,WB,ELISA,等科研项目
规格:1mg/瓶,纯度>95%
推荐使用浓度: 胶体金: 5微克/ml金液;
【工作效价】
ELISA法:1:500~5000
免疫印迹:1:200~5000。
免疫组化:1:20~500。
标记二抗的使用浓度:国产1:100-1:500;进口1:1000-1:5000
具体效价以产品标签为准,Z佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。
纯化方式:亲和层析纯化
来源: balb/c小鼠
缓冲液:0.01PBS+保护剂
【常见问题】
1. 包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,即跳管现象。
2. 用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。
3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。
【保存条件】-20℃保存,保持期为24个月.
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文献和实验在淋球菌单克隆抗体的制备过程中,可通过以下多个环节来保证抗体的特异性和亲和力:
抗原选择与制备
选择合适抗原:挑选淋球菌表面具有特异性且免疫原性强的抗原,如菌毛蛋白、外膜蛋白等。这些抗原应是淋球菌所特有的,且在其致病过程中发挥关键作用,以诱导机体产生具有针对性的抗体。
抗原纯化:采用多种纯化方法,如亲和层析、凝胶过滤等,获得高纯度的抗原。只有纯净的抗原才能准确刺激机体的免疫系统,产生特异性识别该抗原的 B 淋巴细胞,为后续产生特异性抗体奠定基础。
免疫动物
选择合适动物:一般选用 Balb/c 小鼠等对淋球菌抗原免疫反应良好的动物。不同品系的动物对同一抗原的免疫应答存在差异,选择合适的动物可提高产生高特异性和高亲和力抗体的概率。
优化免疫方案:确定合理的免疫剂量、免疫途径和免疫次数。通常采用多次皮下或腹腔注射抗原的方式,初次免疫后进行加强免疫,以逐渐增强动物的免疫反应,促使 B 淋巴细胞产生针对抗原的高亲和力抗体。同时,可加入合适的佐剂,增强抗原的免疫原性,提高抗体的产生水平和质量。
细胞融合与筛选
细胞融合技术:采用聚乙二醇(PEG)等方法将免疫后的小鼠脾脏细胞(含产生抗体的 B 淋巴细胞)与骨髓瘤细胞进行融合,形成杂交瘤细胞。融合过程需严格控制条件,如细胞比例、PEG 浓度和作用时间等,以提高融合效率,增加获得特异性杂交瘤细胞的机会。
筛选阳性杂交瘤细胞:通过特定的筛选方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA),利用包被的淋球菌抗原筛选出能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。在筛选过程中,设置严格的对照,排除非特异性结合的细胞,确保筛选出的细胞能产生针对淋球菌抗原的特异性抗体。此外,还可采用有限稀释法等进行亚克隆,进一步筛选出亲和力高的杂交瘤细胞株。
抗体检测与鉴定
特异性检测:采用多种方法,如免疫印迹(Western blot)、免疫荧光试验(IFA)等,验证抗体与淋球菌抗原的特异性结合能力,同时检测其与其他相关细菌或抗原的交叉反应性。只有与淋球菌抗原特异性结合且无明显交叉反应的抗体,才符合特异性要求。
亲和力测定:运用表面等离子共振(SPR)等技术测定抗体与抗原的亲和力常数。亲和力常数越高,表明抗体与抗原的结合能力越强,抗体的质量越好。对于筛选出的杂交瘤细胞株,可通过多次传代培养和抗体检测,挑选出稳定分泌高亲和力抗体的细胞株进行扩大培养。
生产与质量控制
细胞培养与抗体生产:对筛选出的优质杂交瘤细胞株进行大规模培养,可采用体内培养(如接种到小鼠腹腔内形成腹水)或体外培养(如使用生物反应器)的方法生产抗体。在培养过程中,严格控制培养条件,如温度、pH 值、营养成分等,以保证细胞的生长和抗体的稳定分泌。
质量监控:在抗体生产的各个环节,包括细胞培养、抗体纯化、保存等,进行严格的质量监控。定期检测抗体的特异性、亲和力、纯度、浓度等指标,确保产品质量符合要求。只有经过全面质量检测合格的淋球菌单克隆抗体,才能用于临床诊断、研究或其他应用领域。
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