
花生过敏原Ara H1蛋白;花生过敏原Ara H2蛋白;花生过敏原蛋白;花生过敏原抗原
花生过敏原是指花生中能引起人体免疫系统异常反应的蛋白质成分。
主要过敏原成分及其特点
Ara h 1:属于植物血凝素家族,是一种糖蛋白。它在花生种子中含量较高,有多个 IgE 结合位点,能与过敏患者体内的 IgE 抗体特异性结合引发过敏反应。且对热和消化酶有一定耐受性,在食品加工过程中较稳定,不易被破坏。
Ara h 2:是 2S 清蛋白家族成员,是花生中最主要的过敏原之一,免疫原性很强,极低浓度就能引发过敏。其结构稳定,对消化酶和热处理有抗性,在加工中能保持过敏原性。
Ara h 3:属于 11S 球蛋白家族,在花生种子的储存和萌发中起作用,也能与 IgE 抗体结合引发过敏反应。
过敏反应机制
当过敏体质者摄入或接触花生过敏原后,免疫系统将其识别为有害物质,启动免疫反应。抗原呈递细胞摄取处理过敏原后呈递给 T 淋巴细胞,T 淋巴细胞激活并分泌细胞因子,刺激 B 淋巴细胞产生针对花生过敏原的特异性 IgE 抗体。这些 IgE 抗体结合到肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的 Fc 受体上,使机体处于致敏状态。再次接触花生过敏原时,过敏原与致敏细胞表面的 IgE 抗体结合,导致肥大细胞和嗜碱性粒细胞释放组胺、白三烯、前列腺素等生物活性介质,作用于皮肤、呼吸道、消化道等器官和组织,引起各种过敏症状。
引发的过敏症状
皮肤症状:表现为皮疹、瘙痒、红斑、肿胀,严重时出现荨麻疹或特应性皮炎。
呼吸道症状:有鼻痒、流涕、打喷嚏、咳嗽、喘息、呼吸困难等,严重时可致喉头水肿,危及生命。
消化道症状:包括恶心、呕吐、腹痛、腹泻、便血等。
其他症状:还可能出现眼部瘙痒、流泪、结膜充血,以及头晕、心慌、血压下降等全身症状,严重者可发生过敏性休克。
诊断与检测方法
皮肤点刺试验:将少量花生过敏原提取物滴在皮肤上,用针刺破皮肤,15 - 20 分钟内观察皮肤反应,出现风团和红晕为阳性,提示对花生过敏。
血清特异性 IgE 检测:采集血液检测血清中针对花生过敏原的特异性 IgE 抗体水平,常用放射免疫吸附试验(RAST)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法,抗体水平升高提示对花生过敏。
口服食物激发试验:在医生密切观察下,让患者口服一定量花生或含花生食物,观察是否出现过敏症状,是诊断食物过敏的金标准,但有风险,通常在其他检查结果不明确或需确诊时采用。

花生过敏原 Ara h 1 蛋白标签会因所使用的具体标签不同而有所差异。常见的蛋白标签如 His 标签(多聚组氨酸标签),一般分子量较小,约为 1 - 2 kDa 左右。如果是 GST(谷胱甘肽 - S - 转移酶)标签,分子量相对较大,约为 26 kDa 左右。
Ara h 1 蛋白本身的分子量约为 63 - 65 kDa。所以当 Ara h 1 蛋白融合不同标签后,其总分子量为 Ara h 1 蛋白分子量加上标签分子量。例如,带有 His 标签的 Ara h 1 蛋白,其分子量约为 64 - 67 kDa;带有 GST 标签的 Ara h 1 蛋白,分子量则约为 89 - 91 kDa。
花生过敏原 Ara h 1 蛋白是花生中引起过敏反应的主要成分之一,
结构特点
Ara h 1 蛋白属于植物血凝素家族,是一种糖蛋白。
其分子结构包含多个结构域,具有复杂的三维结构,这种结构使其具有多个 IgE 结合位点,能够与过敏患者体内的 IgE 抗体特异性结合,从而引发过敏反应。
理化性质
相对分子质量较大,约为 63 - 65kDa。
对热和消化酶具有一定的耐受性。在一般的食品加工条件下,如加热、蒸煮等,其结构和过敏原性相对稳定,不易被完全破坏,仍可能引起过敏反应。
免疫原性
Ara h 1 具有较强的免疫原性。当进入人体后,能够被免疫系统识别为外来抗原,激活免疫细胞,引发一系列免疫反应。
它可以诱导机体产生特异性 IgE 抗体,这些抗体在再次接触 Ara h 1 时,会与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的 Fc 受体结合,导致细胞释放生物活性介质,如组胺、白三烯等,从而引起过敏症状。
检测方法
免疫印迹法:将花生蛋白提取物进行聚丙xi酰胺凝胶电泳分离,然后转移到固相膜上,用含有 Ara h 1 特异性抗体的溶液进行孵育,通过检测抗体与 Ara h 1 蛋白的结合来确定其存在。
酶联免疫吸附试验(ELISA):利用 Ara h 1 蛋白与特异性抗体的特异性结合,通过酶标记抗体来检测样品中 Ara h 1 蛋白的含量。该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于食品中 Ara h 1 蛋白的定量检测。
免疫层析法:基于抗原抗体特异性结合的原理,将 Ara h 1 特异性抗体固定在试纸条上,当样品中的 Ara h 1 蛋白与抗体结合后,通过显色反应来判断样品中是否含有 Ara h 1 蛋白。该方法操作简便、快速,适用于现场快速检测。
在过敏诊断和治疗中的作用
诊断:检测患者血清中针对 Ara h 1 的特异性 IgE 抗体是诊断花生过敏的重要方法之一。通过体外检测患者血清中 IgE 抗体与 Ara h 1 蛋白的结合情况,可以辅助医生判断患者是否对花生过敏,以及评估过敏的严重程度。
治疗:目前针对花生过敏的治疗主要是避免接触过敏原和对症治疗。同时,以 Ara h 1 蛋白为靶点的免疫治疗正在研究和临床试验中。通过逐渐增加患者对 Ara h 1 蛋白的接触量,诱导免疫系统产生免疫耐受,从而减轻或消除过敏反应。
花生过敏原 Ara h 2 蛋白本身的分子量约为 17 kDa。
- His 标签:最常用的是 6xHis 标签,分子量为 0.8 kDa 左右6。如果 Ara h 2 蛋白融合 His 标签,其总分子量约为 17.8 kDa。
- GST 标签7:分子量约为 26 kDa。当 Ara h 2 蛋白融合 GST 标签后,总分子量约为 43 kDa。
除了上述标签外,还有其他一些可能使用的蛋白标签,如 Flag 标签等。Flag 标签蛋白为编码 8 个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),分子量较小,通常对蛋白的功能影响较小。具体使用哪种标签以及融合蛋白的分子量,需根据实验目的、表达系统和后续应用等因素来确定。
花生过敏原 Ara h 2 蛋白是导致花生过敏的关键成分之一,
结构特征
Ara h 2 蛋白属于 2S 清蛋白家族,由 14 kDa 和 4 kDa 两条肽链通过二硫键连接而成,形成一个紧密的球状结构。
其结构中含有多个 β - 折叠和少量 α - 螺旋,这种结构使其具有高度的稳定性,也正是其能够耐受消化酶和热处理的结构基础。
理化性质
分子量约为 17 kDa,等电点在 4.5 - 5.5 之间,属于酸性蛋白。
具有较强的水溶性,在花生种子的细胞液中以溶解状态存在。
对热、酸碱和消化酶具有高度稳定性。即使经过高温烘烤、油炸等加工处理,或者在人体消化道的酸性环境和各种消化酶的作用下,其结构和过敏原性也很难被破坏。
免疫特性
免疫原性极强,是花生中最主要的过敏原之一。极低浓度的 Ara h 2 蛋白就能与过敏患者体内的 IgE 抗体发生特异性结合,引发免疫反应。
它含有多个 B 细胞和 T 细胞表位,能够同时激活体液免疫和细胞免疫,促使机体产生大量的特异性 IgE 抗体,并激活肥大细胞、嗜碱性粒细胞等免疫细胞,释放炎症介质,导致过敏症状的出现。
检测方法
ELISA 法:是目前检测 Ara h 2 蛋白最常用的方法之一。利用特异性抗体与 Ara h 2 蛋白的抗原 - 抗体反应,通过酶标二抗结合底物显色来进行定性或定量检测,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。
免疫印迹法:先将花生蛋白提取物进行聚丙xi酰胺凝胶电泳分离,再转印到硝酸纤维素膜或 PVDF 膜上,用含有特异性抗体的溶液进行孵育,通过检测抗体与 Ara h 2 蛋白的结合条带来确定其存在及分子量大小。
免疫传感器法:基于抗原 - 抗体特异性结合的原理,将抗体固定在传感器表面,当样品中的 Ara h 2 蛋白与抗体结合时,会引起传感器的物理或化学信号变化,从而实现对 Ara h 2 蛋白的快速检测,具有实时、在线检测的优势。
在过敏反应中的作用
Ara h 2 蛋白是引发花生过敏的主要效应分子。当过敏体质者摄入含有 Ara h 2 蛋白的花生或其制品后,该蛋白会迅速被免疫系统识别,激活免疫细胞,释放多种炎症介质,如组胺、白三烯、细胞因子等。
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