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武汉华尔纳生物科技有限公司
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细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 (养不活无理由全额退款)

类别 | 原代细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | 专用培养基 |
传代方法 | 可传3-5代左右;3代以内状态最佳 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |







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文献和实验实验材料: 1. 正常兔大脑皮质组织; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. M199培养液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素);D-Hanks液;0.05%胰蛋白酶溶液;0.05%胶原酶溶液;15%右旋糖苷(用Hanks配制,pH7.4); 4. 匀浆器、手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科
的[5],但细胞得率均较低,而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长,而且工作量大、过程繁琐且费用高[1],进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
的问题的,传2-3代进行实验没有问题的),就是传不了几代。 【tomandmikes】是啊,纯度的问题好说,可以摸索控制时间,但是要不加生长因子等刺激物,仅用培养基和血清,很难多次传代。其实消化后的成纤维细胞不是很多,但见了很烦,我且试试你说的方法。不知道用胰酶可以不可以? 【zhaoqingshan】应该是不可以的,我试过,换低浓度的胰酶也不可以的。内皮和成纤维被消化下来的时间差不多。用ECGF 20ug/ml也不是很贵的,我倒觉得胎牛太贵了。因为我以前养脑微血管内皮用ECGF 150ug/ml







