- ￥880 - 2380
- 华尔纳生物
- WN-75075
- 武汉
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
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- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
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- 供应商：
武汉华尔纳生物科技有限公司
- 库存：
999
- 英文名：
K562-GFP-ffluc-CD123
- 生长状态：
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- 年限：
5
- 运输方式：
快递
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细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 （养不活无理由全额退款）
类别 | 稳转细胞系 |
生长特性 | 悬浮生长 |
培养体系 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
细胞形态 | 淋巴母细胞 |
冻存条件 | 1:2~1:4传代，每2～3天传代或换液一次。 细胞库无血清冻存液 |
细胞株构建流程 | 1.构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； 2.慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； 3.用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； 4.采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； 5.单克隆细胞株质检（COA）。 |
细胞备注 | 如混合稳转细胞株带抗性基因，建议每传8～10代用相应抗性药物筛选一次(12μg/mL)；或在细胞培养过程中添加适当浓度的抗性药物以维持细胞株阳性率(1.2μg/mL)。 |
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文献和实验基础。 传统的NK细胞扩增技术是在NK细胞培养体系中添加IL2、IL15等细胞因子以促进NK细胞增殖，但由于扩增效率不高且纯度不够未能得到广泛应用。近年来，有人采用基因工程的方法在K562细胞上同时表达IL-15、CD137L 等分子, 并以此细胞来刺激NK细胞的增殖。IL-15和CD137L联合刺激是PBMC 中NK细胞特异性扩增的基础：作为膜蛋白，通过细胞间的接触刺激，用以诱导NK细胞扩增。IL15能够促进NK细胞的分化成熟，而IL21能够联合IL15分子促进NK细胞的分化成熟，所以本研究在稳定
聚体的比例达90%，具有与Jurkat（CD3+）和K562/A02细胞（Pgp+）结合的活性，与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当且能同时与Jurkat和K562/A02细胞结合形成玫瑰花环。结论 首次成功地构建了抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体，并获得高效表达，表达产物具有与相应二个靶抗原结合的活性，应用针对特异肿瘤抗原的单克隆抗体对肿瘤进行治疗是肿瘤免疫疗法的重要组成部分。与传统化疗相比，单抗具有针对性强的特点，因此避免了对正常组织的杀伤，特别对于清除肿瘤的残留灶、转移灶具有良好应用
后在培养基中加入PHA-L和PMA可以激活Jurkat细胞中CMV启动子，而单PMA就足以激活KG1和K562(人骨髓瘤白细胞)中的CMV启动子。SV40启动子的表达在含有大T抗原(存在于COS-1和COS-7)时会提高，因为大T抗原可以刺激染色体外的合成。 06DNA量 高质量的DNA对于进行高效的转染至关重要。转染的质粒一定纯度好、浓度高、无内毒素。浓度不要低于0.35ug/ul。产物表达，48小时mRNA表达最高；72h蛋白表达最高。 07瞬时/稳定转染表达 稳定基因表达符合长期生产需求
