类器官冻存液

类器官冻存液产品描述

Cat NO: IMV-A002

类器官冻存液可应用于多种哺乳动物(如人、鼠、猪、蝙蝠、牛等)来源的类器官和细 胞系的低温长期保存，该冻存液不含血清，不含任何动物来源成分，含有 10% DMSO。

类器官冻存液产品信息

表 1. 试剂盒组成信息

产品货号	产品名称	产品规格	储存
IMV-A002	类器官冻存液	100mL	2-8℃, 36 个月

冻存和复苏

类器官或细胞的冻存

1. 向离心后的类器官(或细胞)中加入 4℃预冷的类器官冻存液，吹打混匀后迅速转移 至细胞冻存管中(冻存管内细胞悬液体积应大于 0.5mL)。

注:

a) 每 1mL 冻存液推荐冻存 1×103~ 1×107 个细胞或对应细胞量的类器官。

b) 冻存体积过大的/多层上皮的/鳞状细胞组成的类器官时，由于这类结构紧密，可使 用类器官消化液适当消化 3-15min 再使用基础培养基清洗两次后进行冻存。

2. 将冻存管放入细胞冻存程序降温盒内(降温盒须提前平衡至室温)，随后立即将降温 盒放入-80 ℃超低温冰箱中;也可将冻存管进行人工梯度降温处理，如 4℃ 静置 10 min ，-20℃保存 1 小时，-80℃保存过夜。

3. 次日或 12 小时后将冻存管于低温条件下(不高于-70℃,推荐使用干冰或原降温 盒)转移至液氮中长期保存。

类器官或细胞的复苏

4. 提前在 37℃条件下预热类器官或细胞所需的基础培养基。

5. 在 37℃的水浴中快速解冻细胞冻存管，当冻存管内冻存物仅剩些许冰渣残留时立即 停止水浴并及时转移至洁净操作台。

6. 将冻存悬液转移至离心管中，缓缓加入 5-10 倍体积的预热的基础培养基，轻轻混 匀。

7. 将上步骤所获类器官或细胞悬液进行离心(水平离心转子，150-300g ，3 min)，弃 上清，再次加入基础培养基重悬类器官或细胞沉淀。

8. 将上步骤所获类器官或细胞悬液进行离心(水平离心转子，150-300g ，3 min)，弃 上清后所获类器官或细胞可用于后续类器官或细胞的培养。