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- 文献和实验
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100
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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
- 规格:
1 mg
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文献和实验简介:什么是PCR芯片? 实时定量PCR是检测基因表达最灵敏,最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因,因此,每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则工作量巨大,耗时长久。 通过简单的,经过优化的实时定量PCR体系,如SuperArray的RT2ProfilerTM
,但程序设计完全实现自动化要求,而且有两种样品盘可供选择(96孔和384孔)。如果加上一个装载辅件,可以在24h之内完成84个384孔板的样本测定。 2. Roche 公司生产的Lightcycler热循环仪,它以能装载20-25ul的毛细硅管作为反应管进行扩增,光源选用冷光源系统,可以减少光源对样本的影响。由二极管发射蓝光激发荧光,并提供三个滤光片,可利用荧光分光测定的原理,同时对一个反应体系的多种荧光进行检测,所以它完全可以进行多重PCR。由于Lightcycler使用了其独特
:2.1 内嵌染料2.2 双标记探针2.3 FRET探针2.4 分子信标2.5 Ampliflor2.1内嵌染料(Sybr-Green I )内嵌染料,例如Sybr-Green I ,能与双链DNA结合a) SG不与单链DNA结合,荧光信号强度较低b) SG与双链DNA结合,荧光信号强度极大的增强SG是一种荧光染料,能结合到DNA双螺旋的小沟。处于溶解状态的未结合染料显示低 的荧光强度,一旦结合到双链DNA之后荧光信号增强。这种特性被利用在实时扩增中。由于 在扩增反应中DNA增加,染料结合到扩增产物上,荧
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