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文献和实验 Nature 子刊 ｜ IsoNet：基于稳定同位素示踪代谢组学技术开发的新策略
(transsulfuration)，将其半胱氨酸残基替换为丝氨酸，直接生成新代谢物 γ-谷氨酰-丝氨酰-甘氨酸 (γ-Glu-Ser-Gly)。该结果表明，谷胱甘肽不仅是经典抗氧化剂，还可作为内源性硫供体参与代谢调控。这一发现挑战了传统认为 γ-谷氨酰三肽仅通过 ATP 依赖的连接酶合成的认知。 Section.03 稳定同位素标记物: 研究的"发动机" IsoNet 能够成立的前提，是高质量的稳定同位素示踪数据。该研究系统使用了多种碳 13 标记化合物，它们均为全碳 13 标记的化合物如：全碳 13
(四)抗原的标记 1.放射性同位素的选择 选择同位素的原则。 ⑴ 定方法简单、经济、便于推广应用。 ⑵ 易于防护。 ⑶ 同位素与标记物结合好，不易从标记物上脱落。 ⑷ 对标记物不引起辐射损伤，使蛋白变性。 ⑸ 具有较高的计数效率。 目前常用的同位素有3H、125 I，其它还有14C、35S和32P等。① 3H 因所有的有机化合物中均含有氢，用3H来置换氢，不至于影响其原有化合物的化学性质。3H的半衰期长，是一个
，用系统所带的AcquireSC program软件分 析处理扫描结果。1.4.4 回收差异条带用AcquireSC软件将差异条带定位，用一次性手术刀片切割下所需条带，置于30μl去离子水中，37℃水浴30-60 min，备用。1.4.5 差异条带的再扩增以经上述处理的回收条带为模板，T7启动子22-mer（5'GTAATACGACTCACTATAGGGC3’）、反M13（-48）24-mer（5'AGCGGATAACAATTTCACACA GGA3'）为引物，进行再扩增反应：模板2.0μl，20
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