BAA473#信号通路

【求助】磷酸化的Akt不见了！！

(Ser473)(193H12)Rabbit mAb，1:300,稀释，二抗是驴抗兔，1：2000，我是实验室的新手，刚呆俩月，受 此挫折，一头雾水，请过来人或者有经验的同学帮忙解答怎样解决，非常感谢！ 碧峤 pAkt有两个位点，Ser473和Thr308，其中Ser473相对容易显色。如果显色失败，可能的原因:1 上样量过少，我们一般都是30μg；2 一抗孵育时间过短，我们一般24h~48h；3 一抗是否工作有待排除 米宝

眼看它就要封神了...Science 报道烟酰胺可增强胰岛素敏感性、促进肌肉重塑

因为蛋白激酶 AKT 和 mTOR 是胰岛素信号通路中参与调节葡萄糖摄取和肌肉重塑的关键因子，所以研究人员评估了 NMN 补充对肌肉中 AKT 第 473 位丝氨酸和 308 位苏氨酸，以及 mTOR 第 2448 位丝氨酸磷酸化的效果。在 NMN 组注射胰岛素后，肌肉 AKT 和 mTOR 磷酸化水平以及总 AKT 和 mTOR 蛋白丰度均高于治疗前，而安慰剂组无差异，这一结果与体内观察结果，和 NMN 治疗对肌肉胰岛素敏感性的影响是一致的。 图片来源：Science

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

一台 WB 成像系统可以同时拍摄化学发光和荧光信号，这个功能有什么用途呢？一篇 2014 年发表在 Cell Stem Cell 的文章为了研究硫巯基化如何影响信号通路，就需要在进行 Western Blot 时同时捕捉2种信号。 蛋白质硫巯基化（S-sulfhydration, SHY）是一种依赖H2S的蛋白质翻译后修饰。H2S 作用于蛋白质的半胱氨酸残基，把巯基（-SH）转变为硫巯基（-SSH），改变蛋白空间结构，调控了蛋白的活性和功能。 这篇文章主要研究硫化氢（H2S）调节 Ca