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100
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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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10 mM * 1 mL
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文献和实验MOI 值 50-200,puromycin 常规剂量 1-2 µg/mL;一般不需要加助转剂 polybrene。 ②Jurkat 细胞 Jurkat 细胞是一种常用的人类T细胞白血病细胞系,是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 Jurkat 细胞感染慢病毒的 MOI 以 50-80 为宜,一般不需要加助转剂 polybrene。 图 6:慢病毒感染 Jurkat 细胞 ③RAW264.7 细胞 RAW264.7 中文全名为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,属贴壁细胞,最好的形态呈现
细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
步骤: 1) 轻拍几下培养皿 2) 用1ml的枪或者巴氏管把细胞吹下来(吹不下来的舍弃) 3) 细胞吹下来后转移到15ml离心管 4) 1200rpm (约250g)离心3min 5) 去上清,用新鲜培养基重悬细胞 6) 按比例接种到新的培养皿中 传代时机: 1) 当细胞密度较低的时候,可能不太好吹下来。 2) 当细胞密度达到80%~90%的时候,最容易吹下。 ▲推荐的RAW264.7细胞传代密度 RAW 264.7细胞培养之终结
Immunity:「填补教科书」董晨院士团队解析 IL-17D 重要功能,并首次发现其受体
讲到这里已经比较完整了,但为了进一步解析 IL-17D 在 ILC3s 中作用的分子机制,作者对 IL-17D 受体进行了鉴定。作者首先对 IL-17 受体(IL-17R)家族成员进行筛选,结果发现 IL-17D 不与 IL-17R 家族的任一成员结合。通过筛选细胞系,作者发现 IL-17D-hIg 融合蛋白可与 RAW264.7 细胞结合,提示 RAW264.7 细胞上可能有 IL-17D 的受体。将 RAW264.7 细胞与 IL-17D-hIg 孵育后进行免疫沉淀实验,随后结合质谱鉴定筛选
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