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100
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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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5 mg
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文献和实验点。 1.原位杂交在先 细胞和切片标本先用核酸探针做原位杂交,检测DNA或mRNA,接着再进行免疫组织化学反应。检测抗原成分。原位杂交可用放射性核素标记探针,也可用非放射性标记物标记探针,免疫组织化学可用ABC法等。先做原位杂交,尤其是RNA原 位杂交.标本中的mRNA丢失较少,杂交信号较强。但是。在原位杂交的操作过程中,可能 会影响抗原物质的抗原性,会减弱免疫组织化学的染色强度。 标本先做原位杂交,操作步骤基本上按单做原位杂交的程序进行。只是由于杂交前的蛋白酶消化会改变
网络 第三节 有关细胞和组织学技术 一、细胞和组织 免疫组织化学技术是用标记物或显色物标记的抗体检测细胞和组织内的抗原,从而达到诊断和研究疾病的目的。抗原的准确显示和定位与制备的细胞和组织标本质量的好坏有着密切的联系。由于各种抗原的生化、物理性质不同,如温度高低、酸碱度强弱及各种化学 试剂 的作用均可影响抗原
。其制备方法分一步法和两步法;基本原理相同,是使戊二醛的两个醛基之一与酶蛋白的赖氨酸结合,另一醛基与免疫球蛋白上的氨基结合,将酶连结于抗体上。 (1)一步法:将酶、抗体、戊二醛按一定比例混合,经透析除去标记物中剩余的戊二醛,制得酶标抗体。优点是简单省时,缺点是反应程度不易被控制,因为酶蛋白分子和抗体蛋白分子同戊二醛间的反应速率不同,抗体蛋白的氨基数远较HRP为多,与戊二醛反应快,因此在戊二醛的作用下,抗体蛋白易通过分子内和分子间的彼此交联,形成较大的聚合体,而与酶蛋白分子间的交联相应减少
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