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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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文献和实验 Nature 子刊 | IsoNet:基于稳定同位素示踪代谢组学技术开发的新策略
(transsulfuration),将其半胱氨酸残基替换为丝氨酸,直接生成新代谢物 γ-谷氨酰-丝氨酰-甘氨酸 (γ-Glu-Ser-Gly)。该结果表明,谷胱甘肽不仅是经典抗氧化剂,还可作为内源性硫供体参与代谢调控。这一发现挑战了传统认为 γ-谷氨酰三肽仅通过 ATP 依赖的连接酶合成的认知。 Section.03 稳定同位素标记物: 研究的"发动机" IsoNet 能够成立的前提,是高质量的稳定同位素示踪数据。该研究系统使用了多种碳 13 标记化合物,它们均为全碳 13 标记的化合物如:全碳 13
,不需要纯化,组织穿透性 极好。 根椐目的基因的特异性序列设计的探针, 特异性较强。 合成的寡核苷酸探针的缺点是: 探针长度必须适宜,探针太长可造成内部错误配对杂交,探针太短可形成非特异性结合。它 与 mRNA 形成的杂交体不如 cRNA-RNA 杂交体稳定,再则探针较短,所携带的标记物少, 敏感性较低。 依标记物不同,探针又可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类。 前者主要包括 3H、35C、32P 和 125I 等,不同的同位素探针其穿透力、定位和半衰期各不相同,无一种同 位素探针
近些年来,非同位素标记分析技术发展迅速。它主要包括:酶标记分析技术、化学发光分析技术、生物发光分析技术和时间分辨荧光分析技术。信号放大时间分辨荧光分析技术克服了其他技术的缺点,具有非同位素、灵敏度高、标记物制备简单、测量快速和分析动态范围宽等优点,成为一种最有发展前途的非同位素标记分析技术。一、信号放大时间分辨荧光分析技术的原理及特点信号放大时间分辨荧光分析(time-resolved fluorescence assay,TRFA)技术是把生物信号放大、镧系元素螯合物的固有优点以及时
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