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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品最好使用相同的测定时间。 为避免由于质粒 转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参,采用双荧光素酶报告基因检测 试剂盒进行检测;也可以同时转入β-半乳糖甘酶报告基因质粒作为内参,然后采用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒进行检测。采用荧光素酶报告基因检测试剂盒中的报告基因 细胞 裂解液裂解获得的样品,可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因 检测试剂盒中的测定。
在检测试剂盒的设计上。典型 HMT 检测试剂盒用 3H-SAM 作甲基供体,并将 S-腺苷高半胱氨 酸 (SAH) 测定为甲基化反应的一般副产物。但是,这需要 处理放射性物质 较高的灵敏度,以克服甲基供体 SAM 的低 kcat(转化数通常 预先纯化酶/蛋白复合物,以评估特定 HMTs 的活性 比色或荧光检测简便,无放射性 与核提取物或纯化蛋白的相容性(检测试剂盒对目标修饰具有特异性) 3 小时内即可提供数据 表征去甲基酶活性 组蛋白去甲基化酶活性检测试剂盒通常测定
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