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- 2026年02月09日
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深圳顺辰生物技术有限公司
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仅供科研研究、实验使用
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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年，曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员，负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有：细胞培养（Cell Culture）试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学（taxonomy）分析技术等20余项，详细的项目可以咨询在线客服！
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文献和实验WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时，磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分，处理不得当时，还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多，比如封闭问题，抗体问题，或所需的磷酸化蛋白可能不存在于样品中或者低于 WB 检测的量。然而，有一个常被大家忽视的重要原因就是蛋白样品制备所用的方法是否适合于磷酸化蛋白的提取？其实蛋白质提取的方法不仅影响提取效率，还会影响蛋白的质量
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？
90, c-Src, 和 tubulin，表明这些蛋白在 RIPA 不可溶组分中大量存在（下图）。Wang 等 [6] 对比 SDS 加热法和 RIPA 裂解液法从斑马鱼肝脏肿瘤中提取蛋白，发现 RIPA 裂解液提取这些样品时对于大分子量蛋白的提取效率十分低（下图）。Li[7] 对比了从小鼠脾脏和肝脏中提取总蛋白 RIPA 可溶和不可溶性组分以及基于离心管柱法商业试剂盒提取的蛋白质图谱，发现 RIPA 不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似，但是不完全相同。这些丢失的不可溶组分覆盖了整个蛋白质图谱分子
脏蛋白提取得到蛋白质图谱[1]： 图 1：从小鼠脾脏和肝脏中使用不同方法提取总蛋白的蛋白图谱 条带 1 为柱式法提取的蛋白样品，条带 2 为 RIPA 可溶组分（RIPA 裂解后的上清），条带 3 为 RIPA 不可溶性组分（丢弃的沉淀部分）。实验发现 RIPA 的不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似，但是不完全相同。 丢弃的不可溶组分中仍然可检测到许多蛋白条带，覆盖了整个蛋白质图谱分子量范围，不同样品的不可溶组分图谱也各不相同。丢失的蛋白会引起蛋白图谱发生变化，改变不同种类蛋白的比例，且具有
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