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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
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文献和实验X 的原液)。上样缓冲液包括如下组分: 密度成分,如甘油或蔗糖,增加样品粘度,确保样品沉入孔中。 盐,如 Tris-HCl,为样品创造良好的离子强度和 pH 值环境。高盐浓度的上样缓冲液会产生更大片或扭曲的条带以及污点。 金属螯合剂,如 EDTA,可阻止样品中的核酸酶降解核酸。 染料 为监测样品的上样、电泳进展和 pH 值变化提供了颜色指示。部分上样缓冲液可能包含多个染料,以便有效跟踪样品中不同大小分子的迁移。 通常,上样染料都是带负电荷的小分子,因此迁移方向与核酸相同。其中有的显示pH值颜色,上样
强度一般在0.02-0.2之间。 2)指示剂 电泳过程中,常使用一种由颜色的标记物以指示样品的迁移过程。核酸电泳常用的指示剂有两种:溴酚兰——成蓝紫色;二甲苯青——成蓝色。溴酚兰的分子量为670Da,在不同浓度凝胶中,迁移速度基本相同,它的分子筛效应小,近似于自由电泳,故普遍用作指示剂。二甲苯青的分子量为554.6Da,携带的电荷量比溴酚兰少,在凝胶中迁移率比溴酚兰慢,常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳,也有溴酚兰和二甲苯青混合应用。指示剂一般加在上样缓冲液中,为了使样品能沉入胶孔,还要加入适量的蔗糖、聚蔗糖
或聚蔗糖400组成上样缓冲液。作用:①增加样品比重,以确保DNA均匀沉入加样孔内。②形成肉眼可见的指示带,预测核酸电泳的速度和位置。③使样品呈色,使加样操作更方便。 核酸染色剂:溴化乙锭(EB):是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下,发出红色荧光。其荧光强度与DNA的含量成正比。据此可粗略估计样品DNA浓度。琼脂糖凝胶EB染色,肉眼可见核酸电泳带。注意事项:EB是致癌物质,切勿用手接触,更不要污染环境。 操作步骤: 1. 凝胶制备 制备0.8%琼脂糖凝胶。称取
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