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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
1T/盒
产品用途
CAR-T细胞制备试剂盒是一种一站式的工具,专为加速CAR-T细胞疗法的开发和生产而设计。
产品说明
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种,具有将外源基因稳定地整合进宿主细胞基因组中的能力,这种高效的整合性转染特点使其成为基因治疗领城理想的载体之一。慢病毒还可广泛感染多种细胞类型,包括原代细胞、干细胞、神经元等难以转染的非增殖细胞,从而显著拓宽了基因治疗的适用范围。默赛尔生物公司自主研发的CAR-T细胞制备试剂盒提供了一站式解决方案,其中包括我们自主生产的多种慢病毒、优化后的侵染试剂以及多种GMP级的人源化细胞因子。这些组件的协同作用使得试剂拿能够在体外直接使用外周血PBMC细胞,无需经过繁琐的磁珠分选激活步骤,最终获得CAR阳性率超过20%的高纯座CAR阳性T细胞,极大地简化了CAR-T细胞的制备流程,提高了制备效率。
CAR-T细胞制备试剂盒靶点列表:
| 名称 | 质粒图谱绘制 CAR特异性引物设计 |
| CD19 | 已完成 |
| CD20 | 已完成 |
| CD22 | 已完成 |
| HER2 | 已完成 |
| GD2 | 已完成 |
| BCMA | 已完成 |
| meso | 已完成 |
| cMet | 已完成 |
| GPC3 | 已完成 |
| NYESO1 | 已完成 |
| Claudin18.2 | 已完成 |
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文献和实验批次的未耗竭CAR-T细胞进行比较。每天从检测板的所有孔中提取细胞因子样品(10 μL),72小时后,使用iQue®人类T细胞耗竭试剂盒对细胞和上清液进行量化。结果如图3所示。 图3. CD19+ Ramos细胞系激发抗-CD19的CAR-T细胞表现出明显的耗竭表型 细胞因子的分泌,包括IFNγ和TNFα,在含有耗竭的CAR-T和Ramos细胞共培养的孔中均很低(图3A和B)。相对而言,新鲜CAR-T细胞分泌的IFNγ和TNFα水平明显较高,48小时的峰值浓度分别为3.5±0.2 ng
种类细胞的各项关键参数,效率低下且消耗样品量高。 方案:此案例中我们展示了使用iQue®以及人T细胞记忆细胞与细胞因子分析试剂盒(TCA)的多重性分析功能在T细胞表型和功能分析监测中的应用。TCA包含用于识别T细胞和识别初始Tscm、Tcm和TEFF的抗体标记物。此外,通过同时进行IFN和IL-10分泌情况的定量分析和表型分析来进行细胞功能分析。实验中使用来自三个供体的人外周血单核细胞(PBMC),并在14 种不同的培养条件下进行筛选研究。多重性筛选大大提高了筛选效率。 图2. 在添加细胞因子的培养
包装细胞293T细胞的培养一、293T细胞的冻存1. 随着传代的次数增加,293T细胞会出现生长状态下降,出现突变等。所以要在细胞购进时就进行大量冻存,以保证实验的稳定性和持续性。2. 在细胞对数生长期进行冻存,增加细胞复苏成活率。3. 倒去细胞上清液,加入D-Hank's液洗去残留的培养基。4. 加入0.25%的胰酶,消化10-20s后倒去。5. 镜下观察细胞变圆,细胞间间隙加大时,加入新鲜培养基吹打混匀。6. 细胞计数。7. 将细胞离心,1000rpm,2min。8.根据计数结果加入











