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管
深红酵母= ACCC20252、AS2.530安瓿管放在一个平坦的地方,用锉刀或砂轮在安瓿管凹口处用力划一圈,用含 75%酒精的棉絮擦拭安瓿管凹口处,用 6-8 层无菌纱布包住 深红酵母= ACCC20252、AS2.530安瓿管凹口处,在凹口处掰断。 (注意:不要使用含有酒精的纱布)。使用无菌长滴管,向安瓿管中加入 0.3 至 0.5 毫升合适的复苏液溶解。将 深红酵母= ACCC20252、AS2.530转接在 1-2 个适当的平板上,在指定的条件下进行培养。在确认其纯度后,才能 在新鲜培养基中进行继代培养,建议采用液体培养同时复苏菌株。
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贴壁后加入2mg/L As2O3药物. 置37℃ 50mL/L CO2孵箱培养,按预定时间,将细胞全部收集离心,弃上清加入PBS洗十次,制成细胞悬液,吸200μL,加入8Μl AO/EB染液,充分混匀,滴于玻片上,分别计数. 早期凋亡细胞(VA)核染色质着绿色,呈固缩状或圆珠状. 晚期凋亡细胞(NVA)核染色质着桔红色,呈固缩状或破裂状. 坏死细胞(NVN)核染色质着桔红色,呈正常细胞结构. 活细胞(VN)核染色质着绿色,呈正常细胞结构. 细胞凋亡率按以下公式计算: 细胞凋亡率%=VA+NVA
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深红酵母= ACCC20252、AS2.530
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