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文献和实验化学切割错配法(chemical cleavage of mismatch,CCM)
CCM为在Maxam-Gilbert测序法的基础上发展的一项检测突变的技术,其检测突变的准确性可与DNA测序相仿。其基本原理为将待测含DNA片段与相应的野生型DNA片段或DNA和RNA片段混俣变性杂交,在异源杂合的双链核酸分子中,错配的C能被羟胺或哌啶切割,错配的T能被四氧化饿切割,经变性凝胶电泳即可确定是否存在突变。该法检出率很高,也是检片段最长的方法,已有报功检测了1.7kb片段,如果同时对正、反义链进行分析,检出率可达100%。应用荧光检测系统可增强敏感度,可检测到10个细胞
Detection of Mutations in DNA by Solid-Phase Chemical Cleavage Method: A Simplified Assay
Chemical Cleavage of Mismatch (CCM) is one of the methods of choice for mutation research and diagnosis of inherited diseases, as it is capable of detecting 100% of single-base mismatches (1 ). The scientific background of CCM stems
。 重复性高:柱式法消除了手动匀浆带来的人为误差,只要离心力和时间固定,实验结果批间差小。 组分清晰,一盒多用:一次实验不仅能拿到质膜蛋白,还能同时获得胞浆蛋白、细胞器蛋白和核蛋白(粗提),方便你进行亚细胞定位分析。 兼容性广:获取的质膜沉淀可以用于纳米材料修饰,脂质组学分析。溶解沉淀后获得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western Blot、ELISA、IP、Co-IP、质谱(MS)、2-D电泳等多种下游应用。 操作有多简单?真的就是“过柱子” 以细胞样品为例
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