禽流感病毒N6亚型(AIV-N6)核酸检测试剂盒

产品名称：禽流感病毒N6亚型(AIV-N6)核酸检测试剂盒
Name   ： Avian Influenza Virus subtype N6 Detection Kit
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒用禽流感病毒 N6 亚型的 NA 基因保守区设计特异性引物和探针，采用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽流感病毒 N6 亚型 RNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染病料的病原学诊断。
技术参数
项目               参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        拭子样品：采集咽喉拭子时将拭子每人喉头及上颚裂来回刮 2 次~3 次并旋转，取分泌液；采集泄殖腔拭子时将拭子深入泄殖腔至少旋转 3 圈并沾取少量粪便；将采样后的拭子分别放入盛有 1.2 mL 样品稀释液（配制方法见 GB/T 18936-2020 高致病性禽流感诊断技术）的 2 mL 采样管中，编号并填写相应采样单。 发病禽鸟可无菌采集气管、肺、脑、肠（包括内容物）、肝、脾、肾、心等组织脏器，装入 15 mL 或 50 mL 带螺口的有机材料保存管中，编号并填写相应采样单。
保存和运输    采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：将棉拭子充分捻动、挤干后弃去拭子；粪便，研碎的组织加 PBS 充分研磨，按照 1g 组织加 10 mL PBS 的比例配成悬液。样品液经 3 000 r/min 离心 10 min，取上清作为核酸检测材料。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
禽流感是禽类流行型感冒的简称，它是由甲型流感病毒的一种亚型(也称禽流感病毒)引起的一种急性传染病，    经变异后也能感染人类，被国际兽疫局定为甲类传染病。禽流感病毒(AIV)为正粘病毒科甲型流感病毒属，单股 负链 RNA 病毒。依据其外膜血凝素(H)和神经氨酸酶(N)蛋白可分为 H 亚型和 N 亚型，目前已发现 18 个 HA 和11 个 NA 亚型。 本试剂盒适用于检测拭子样品、气管、肺、脑、肠（包括内容物）、肝、脾、肾、心等组织脏器中 N6 亚型禽流感病毒 RNA，适用于 N6 亚型禽流感病毒感染的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。