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文献和实验膜蛋白的重要性不言而喻,假如细胞膜是守护细胞的城墙,而膜蛋白就是站在城墙上的各司其职的士兵,肩负着把守城门、传递信号、运输物质等重要职责。膜蛋白 一旦“失守”,就会造成细胞功能紊乱,进而引起组织和器官发生病变,使身体遭受病痛侵扰。这也就是为什么膜蛋白成为大多数重要的药物研究对象和靶点。在人体蛋白中,有大约30%是膜蛋白,FDA批准的新药中,绝大多数都以膜蛋白为靶点,几乎所有的膜蛋白都是研究热点。然而让人吃惊的是,乐观估计,目前已经被透彻研究清楚结构的膜蛋白仅占膜蛋白总量的1%。究其原因,是因为
到细胞外;微囊泡(Microvesicles)直径为 100-1000 nm,以出芽的形式释放到细胞外;凋亡小体(Apoptotic body)直径为 50-2000 nm,由凋亡细胞产生。由于各种胞外囊泡的大小可能有交叉,所以要想通过分离手段得到某种纯化的特定囊泡是很难实现的。 图一 胞外囊泡的分泌 (图片来源于文献) 外泌体携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类和核酸,其中蛋白质包括跨膜蛋白、信号转导蛋白、细胞支架蛋白、酶等,现在很多文献会选择其中的几种膜蛋白和膜内蛋白作为外泌体的鉴定
MTT/CCK8/LDH等终点法技术升级方案--基于阻抗方法实时、无标记、长期监测细胞表型
细胞过程的集合体,这些过程导致细胞特定的形态和功能。细胞表型检测主要类型有:细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、活力、信号通路及屏障功能等。 针对细胞表型的检测方法主要为需要标记物的“终点法”。例如, 活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死亡细胞无此功能,因此MTT试剂盒可用于细胞存活及生长的检测;LDH(EC1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可
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