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大鼠耳痤疮模型构建

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  • 2026年02月27日
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    一、动物选择与分组

    • 动物品系:常用健康雌性SD大鼠(6-8周龄,体重200-250g)或Wistar大鼠。
    • 分组设计:通常分为空白组(无处理)、模型组(P. acnes注射)、生理盐水对照组,部分研究增设治疗组(如药物干预)。

    二、模型构建步骤

    1. 菌液制备

    • 菌种选择:痤疮bing酸杆菌(P. acnes),需在厌氧条件下培养增殖。
    • 灭活处理:菌液经95℃水浴灭活15分钟,调整浓度为6×10⁸ CFU/ml(生理盐水稀释)。

    2. 诱导方法

    • 单次注射法:在大鼠双侧外耳廓中央皮下注射50μl灭活菌液,注射后标记位置。
    • 连续注射法:部分研究连续3天注射菌液(50μl/次),增强炎症反应。
    • 油酸预处理:部分模型先涂抹50%油酸(0.2ml/次)7天诱导毛囊角化,再注射菌液模拟复合病理过程。

    3. 模型验证

    • 微生物检测:注射24小时后取耳廓组织进行细菌培养,确认P. acnes感染。
    • 组织病理学:7天后处死大鼠,取耳廓组织进行HE染色,观察炎症细胞浸润、毛囊扩张及脓肿形成。
    • 炎症因子检测:通过RT-PCR或ELISA检测TNF-α、IL-6、MMP-2等基因或蛋白表达水平。

    三、实验干预与评估

    • 治疗组设计:模型成功后分组干预,如局部注射干细胞上清液、药物涂抹(如三黄凝胶、异维A酸等)。
    • 疗效评估
      • 肉眼观察:记录耳廓肿胀、丘疹、脓疱等皮损程度。
      • 分子机制:检测TLR2/4、IFN-β等信号通路相关因子,分析抗炎机制。

    四、关键参数与注意事项

    1. 菌液浓度:过高可能导致急性坏死,建议控制在6×10⁸ CFU/ml以内。
    2. 注射部位:需精准定位外耳廓皮下,避免穿透皮肤或损伤深层组织。
    3. 模型稳定性:油酸预处理可增强角化异常,但可能延长造模周期(需14-28天)。
    4. 伦理规范:实验需符合动物福利标准,减少疼痛与感染风险。

    五、模型优缺点

    • 优势:操作简便、成本低,能较好模拟痤疮炎症反应。
    • 局限性:难以完全复制人类痤疮的复杂病理(如雄激素调控),需结合多因素诱导。

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