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500μg 猫瘟热病毒单克隆抗体;猫瘟抗体;猫FPV抗体

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  • ¥1000
  • 沸雪基因
  • PHY-Ag-MG29
  • 杭州
  • 2025年12月13日
  • ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测
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      杭州费雪

    • 库存

      20

    • 级别

      优级纯

    • 克隆性

      单克隆

    • 抗原来源

      天然/重组

    • 保质期

      3年

    • 抗体名

      猫瘟热病毒单克隆抗体

    • 标记物

      FITC等

    • 宿主

      小鼠

    • 适应物种

      小鼠

    • 免疫原

      猫瘟热病毒蛋白

    • 亚型

      IgG;IgG2a;IgM

    • 形态

      液体

    • 应用范围

      ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测

    • 保存条件

      -20℃以下

    • 浓度

      4mg/ml

    • 规格

      500μg

    500μg 猫瘟热病毒单克隆抗体;猫瘟抗体;猫FPV抗体

    猫瘟热是一种高度接触性的传染病毒性疾病,主要发生于一岁以内的幼猫,临床症状表现为发热、白细胞减少呕吐和出血性肠炎,是家猫最常见的一种非常危险的传染病。

    产品细节图片1

    猫瘟热病毒(Feline Panleukopenia Virus,FPV),也被称为猫泛白细胞减少症病毒,其主要蛋白包括结构蛋白 VP1、VP2、VP3 和非结构蛋白 NS1、NS2,以下是这些蛋白的具体参数:

    结构蛋白

    VP1

    分子量:约为 87 - 90 kDa。

    氨基酸组成:由约 770 - 800 个氨基酸残基组成。

    功能:包含磷脂酶 A2 结构域,在病毒入侵细胞时,对病毒与细胞膜的融合及病毒基因组的释放起关键作用,同时还与病毒的毒力和宿主范围相关。

    VP2

    分子量:约为 66 - 70 kDa。

    氨基酸组成:由约 600 - 620 个氨基酸残基组成。

    功能:是病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳的大部分,占病毒粒子总蛋白的 90% 以上。VP2 蛋白含有多个抗原表位,是诱导机体产生中和抗体的主要抗原,在病毒的免疫原性方面发挥关键作用。

    VP3

    分子量:约为 32 - 35 kDa。

    氨基酸组成:由约 300 - 320 个氨基酸残基组成,是 VP2 蛋白经蛋白酶水解产生的 C 末端片段。

    功能:参与病毒衣壳的构成,有助于维持病毒粒子的结构稳定性。

    非结构蛋白

    NS1

    分子量:约为 76 - 80 kDa。

    氨基酸组成:由约 680 - 700 个氨基酸残基组成。

    功能:具有解旋酶、ATP 酶等多种酶活性,是病毒复制和转录的关键蛋白。它可与病毒 DNA 结合,启动病毒基因组的复制,并参与调控病毒基因的转录和表达。此外,NS1 蛋白还能与宿主细胞的多种蛋白相互作用,影响宿主细胞的代谢和信号转导通路,促进病毒的复制和增殖,同时也是一种较强的免疫原,能诱导机体产生细胞免疫反应。

    NS2

    分子量:约为 17 - 20 kDa。

    氨基酸组成:由约 150 - 180 个氨基酸残基组成。

    功能:其功能尚未完全明确,可能与病毒的装配、释放或宿主细胞的病理变化有关,参与调节病毒在细胞内的运输和释放过程,对病毒的传播和感染性有一定影响。

    产品细节图片2

    猫瘟热病毒单克隆抗体的技术参数如下:
    1. 抗体类型与亚型:一般为 IgG 型,常见亚型如 IgG2a 等。IgG 型抗体在体内分布广泛、半衰期长,能有效识别并结合猫瘟热病毒抗原。
    2. 亲和力常数:高亲和力的抗体可紧密特异地结合猫瘟热病毒抗原,即便抗原浓度低也能高效结合,利于在免疫检测和治疗中精准识别并清除病毒。
    3. 特异性:对猫瘟热病毒具有高度特异性,与其他病毒(如猫杯状病毒、猫疱疹病毒等)及猫体内其他病原体无交叉反应,确保检测和诊断时能准确识别猫瘟热病毒感染,避免假阳性。
    4. 效价:ELISA 效价通常在 1:5000 以上(不同产品和检测条件下会有差异),腹水 McAb 的 ELISA 效价在 10^{-4}<\inline_LaTeX_Formula> - 10^{-5}<\inline_LaTeX_Formula > 之间。高效价抗体在免疫检测等实验中,使用较低浓度就能获得良好效果,可降低成本并提高检测灵敏度与准确性。
    5. 识别表位:针对猫瘟热病毒的特定抗原表位,如 VP1、VP2 蛋白上的特定区域。这些表位对病毒感染、免疫逃避及与宿主免疫系统相互作用至关重要,单克隆抗体通过结合关键表位,阻断病毒与宿主细胞结合或激活免疫反应清除病毒。
    6. 稳定性:在不同储存条件下和一定时间内保持稳定。短期保存数周内活性稳定。在接近生理 pH 值(pH 7 - 7.4)的缓冲液体系中较稳定。
    7. 功能性:在体外实验中,能有效识别和结合猫瘟热病毒抗原,可用于免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹等检测方法,准确检测猫瘟热病毒抗原或抗体。在动物实验中,具有一定中和活性,能减轻猫瘟热病毒感染引起的病理损伤,降低病毒在体内的负荷,为免疫治疗提供潜在应用价值。
    8. 纯化方法:常采用亲和层析纯化,如 Protein A + Protein G 亲和层析法,可获得高纯度的单克隆抗体,提高抗体质量和稳定性,降低杂质引起的不良反应。
    9. 蛋白纯度:>95% by SDS - PAGE。

      品牌:PhyCell/费雪

      亚 型:IgG

      免疫原:猫瘟热病毒蛋白

      来源:BALB/C小鼠

      蛋白纯度:> 95%  by SDS-PAGE.

      纯化方法(Purification):亲和层析纯化 

      缓冲液:0.01PBS+保护剂

      规格:0.5mg,1mg,

      推荐使用浓度: 胶体金: 5微克/ml金液;

      【工作效价】 

      ELISA法:1:500~5000

      免疫印迹:1:200~5000。

      免疫组化:1:20~500。

      标记二抗的使用浓度:国产1:100-1:500;进口1:1000-1:5000

      具体效价以产品标签为准,使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。

      【常见问题】

      1. 包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,即跳管现象。

      2. 用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。

      3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。

      【保存条件】-20℃保存,保持期为24个月.

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    猫瘟热病毒单克隆抗体的制备过程主要包括免疫动物、细胞融合、筛选阳性杂交瘤细胞、克隆化培养、单克隆抗体的生产与纯化等步骤,以下是具体介绍:

     

    1. 免疫动物:通常选择 Balb/c 小鼠作为免疫对象。将猫瘟热病毒或其特定抗原成分,按照一定的免疫程序接种到小鼠体内。一般会进行多次免疫,如初次免疫后间隔一定时间进行加强免疫,以刺激小鼠的免疫系统产生针对猫瘟热病毒的特异性 B 淋巴细胞。
    2. 细胞融合
      • 取脾细胞:在最后一次免疫后的合适时间,取出免疫小鼠的脾脏,将其制成单细胞悬液,其中含有产生抗体的 B 淋巴细胞。
      • 准备骨髓瘤细胞:选择合适的骨髓瘤细胞系,如 SP2/0 细胞,该细胞具有永生性且缺乏次黄嘌呤 - 鸟嘌呤 - 磷酸核糖转移酶(HGPRT),在特定培养基中不能合成 DNA。将骨髓瘤细胞培养至对数生长期,然后收集细胞并调整细胞浓度。
      • 细胞融合:将脾细胞与骨髓瘤细胞按照一定比例混合,加入聚乙二醇(PEG)作为细胞融合剂,促使两种细胞发生融合。在融合过程中,会形成多种类型的细胞,包括脾细胞 - 脾细胞融合细胞、骨髓瘤细胞 - 骨髓瘤细胞融合细胞以及脾细胞 - 骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞。
    3. 筛选阳性杂交瘤细胞:融合后的细胞悬液接种到含有次黄嘌呤 - 氨基蝶呤 - 胸腺嘧啶核苷(HAT)的选择培养基中。由于骨髓瘤细胞缺乏 HGPRT,在 HAT 培养基中无法合成 DNA 而死亡;未融合的脾细胞在体外培养条件下不能长期存活。只有脾细胞 - 骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞无限增殖的特性,又具有脾细胞产生特异性抗体的能力,能够在 HAT 培养基中生长。通过间接 ELISA 等方法,筛选出能够分泌抗猫瘟热病毒抗体的阳性杂交瘤细胞。
    4. 克隆化培养:对筛选出的阳性杂交瘤细胞进行克隆化培养,以获得单个细胞的克隆,确保产生的抗体具有高度均一性和特异性。常用的克隆化方法有限稀释法和软琼脂平板法等。
      • 有限稀释法:将阳性杂交瘤细胞稀释到较低浓度,使每个孔中平均只有一个细胞,然后在 96 孔细胞培养板中培养,通过检测培养上清液中的抗体,筛选出单个细胞增殖形成的阳性克隆。
      • 软琼脂平板法:将杂交瘤细胞与融化的软琼脂混合,铺在培养皿中,待琼脂凝固后,单个细胞在软琼脂中增殖形成克隆,挑取单个克隆进行培养和抗体检测。
    5. 单克隆抗体的生产与纯化
      • 体内培养:将筛选出的阳性杂交瘤细胞接种到同系 Balb/c 小鼠腹腔内,形成腹水。由于小鼠腹腔内环境有利于杂交瘤细胞生长和抗体分泌,腹水中可含有高浓度的单克隆抗体。一段时间后,收集腹水,从中获取单克隆抗体。
      • 体外培养:利用细胞培养技术,在生物反应器或细胞培养瓶中大规模培养杂交瘤细胞,收集培养上清液,从中获得单克隆抗体。为提高抗体产量,可采用无血清培养基或添加某些生长因子等方法优化培养条件。
      • 纯化:常用的纯化方法有蛋白 A/G 亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。蛋白 A/G 亲和层析可特异性地结合抗体的 Fc 段,能有效去除杂质,获得高纯度的单克隆抗体;离子交换层析和凝胶过滤层析则根据抗体的电荷性质和分子大小进行分离纯化,进一步提高抗体的纯度。
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