碱性乙醇分化液

蛋白质的提取的两种常用方法

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。（一）水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取

碱性磷酸酶的分离与纯化

一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理； 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀，其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80，82％的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加，从而使溶质的溶解度降低

苏木素-伊红染色法（HE染色法）检测细胞凋亡

20ml醋酸，室温保存，用前过滤。 （2）伊红染色液：取蒸馏水 75ml，先将少许蒸馏水加入0.5～1.0g伊红，用碾棒将伊红碾碎，再加入全部蒸馏水，溶解后加入95%乙醇25ml，最后滴入醋酸1～2滴。 （3）盐酸乙醇分化液：盐酸0.5ml，75%乙醇100ml。 （4）二甲苯，100%乙醇，95%乙醇，80%乙醇，75%乙醇，蒸馏水。 （5）甲醇，苦味酸，中性树胶。 （6）组织切片机，离心机，光学显微镜，离心涂片机。 【操作方法】 1、石蜡切片的HE染色 取一组