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- BHcell（博辉生物）
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- 2025年07月09日
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文献和实验【求助】用带GFP标签的microRNA质粒能用于luciferase实验吗？
dlh110 我构建了个microRNA的带GFP标签的质粒，不知道能不能与目的基因的3’UTR luciferase报告载体共转来检测luciferase的活性？ bigbang_0_0 这个实验还要谨慎考虑一下，GFP的绿色荧光可能会干扰luciferase检测结果。 另外你说的microRNA带GFP标签，你要保证两个东西都要有表达且保持活性，建议你最好把这两个东西构建成两个转录单位，由两个启动
表达的调控，单单靠GLA4不知道能不能起到调控蛋白表达的目的？有这方面的文献吗？先谢谢各位大侠的帮助了！！！！ shilei5794749 类似GAL4-UAS系统，楼主可以借鉴这个系统。GLA4可以用pGBKT7或者pBIND上的，做成删除NLS序列的GAL4(BD+AD)或者GAL4BD-VP16。此质粒还可融合你要研究的蛋白，上游可以加调控元件。 另一个质粒用UAS序列打头，后置报告基因就行啦！ 版主dnazyme留言:
-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
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